Prueba de alto rendimiento "FP-Tag" para la identificación de inhibidores de la glucosiltransferasa

Área de la Ciencia:

• Microbiología
• La bioquímica
• Descubrimiento de drogas

Sus antecedentes:

• Los polisacáridos capsulares bacterianos son factores de virulencia clave en los patógenos Gram negativos.
• En estos polisacáridos está presente un extremo conservado de glicolipidos que contiene ácido 3-deoxy-β-d-mano-oct-2-ulosónico (β-Kdo).
• Las β-Kdo glicosiltransferasas son una nueva familia de enzimas y objetivos antivirulentos atractivos debido a su baja homología con otras glicosiltransferasas.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un ensayo de cribado de alto rendimiento para las glicosiltransferasas β-Kdo.
• Identificar nuevos inhibidores de las β-Kdo glicosiltransferasas utilizando el ensayo desarrollado.
• Explorar el potencial de los productos naturales marinos como agentes antivirulentos.

Principales métodos:

• Desarrollo de un ensayo de cribado de alto rendimiento basado en la polarización de fluorescencia (etiqueta FP) para las glicosiltransferasas β-Kdo.
• Evaluación de una biblioteca de productos naturales marinos mediante el ensayo FP-tag.
• Identificación de inhibidores del plomo dirigidos a la familia de enzimas de la glicosiltransferasa β-Kdo.

Principales resultados:

• Se desarrolló con éxito un ensayo funcional de etiqueta FP para el cribado de alto rendimiento.
• Se identificó una clase de productos naturales marinos como potentes inhibidores de las β-Kdo glicosiltransferasas.
• Los inhibidores identificados representan potenciales pistas de antivirulencia contra los patógenos Gram-negativos.

Conclusiones:

• El ensayo FP-tag es una herramienta valiosa para el cribado de las glucosiltransferasas y puede adaptarse a otras enzimas.
• Los productos naturales marinos ofrecen una fuente prometedora para el desarrollo de nuevas terapias antivirulentas.
• Dirigirse a las β-Kdo glicosiltransferasas es una estrategia viable para combatir las infecciones bacterianas.