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RNA-seq03:21

RNA-seq

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RNA sequencing, or RNA-Seq, is a high-throughput sequencing technology used to study the transcriptome of a cell. Transcriptomics helps to interpret the functional elements of a genome and identify the molecular constituents of an organism. Additionally, it also helps in understanding the development of an organism and the occurrence of diseases. 
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Ribosome Profiling02:24

Ribosome Profiling

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Applications of ribosome profiling
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Super-resolution Fluorescence Microscopy01:37

Super-resolution Fluorescence Microscopy

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Super-resolution fluorescence microscopy (SRFM) provides a better resolution than conventional fluorescence microscopy by reducing the point spread function (PSF). PSF is the light intensity distribution from a point that causes it to appear blurred. Due to PSF, each fluorescing point appears bigger than its actual size, and it is the PSF interference of nearby fluorophores that causes the blurred image. Various approaches to achieving higher resolution through SRFM have recently been...
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Imágenes de superresolución a escala de transcriptoma en tejidos mediante el ARN seqFISH

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  • 1Division of Chemistry and Chemical Engineering, California Institute of Technology, Pasadena, CA, USA.

Nature
|March 27, 2019
PubMed
Resumen
Este resumen es generado por máquina.

Los investigadores desarrollaron seqFISH+, un nuevo método para obtener imágenes de 10.000 genes en células individuales. Esta técnica de alta resolución mapea los tipos de células y su organización espacial en el cerebro del ratón para el descubrimiento biológico.

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Área de la Ciencia:

  • Biología unicelular
  • Imágenes moleculares
  • La neurociencia

Sus antecedentes:

  • Las imágenes precisas del transcriptoma in situ son cruciales, pero están limitadas por la resolución óptica y la densidad de transcripción.
  • Los métodos existentes luchan por capturar el transcriptoma completo dentro de las células individuales en su contexto de tejido nativo.

Objetivo del estudio:

  • Presentar un método avanzado de fluorescencia secuencial en hibridación in situ (seqFISH +) para imágenes de alta resolución en todo el transcriptoma en células individuales.
  • Demostrar la capacidad de seqFISH+ para mapear la organización celular y la expresión génica dentro de tejidos intactos.

Principales métodos:

  • Desarrolló una versión evolucionada de la fluorescencia secuencial en hibridación in situ (seqFISH +).
  • Se aplicó seqFISH+ utilizando un microscopio confocal estándar para obtener imágenes de ARNm de 10.000 genes en tejidos cerebrales de ratones (corteza, zona subventricular, bulbo olfativo).

Principales resultados:

  • Logró una alta precisión, imágenes de resolución de límite de difracción de 10.000 genes por célula.
  • Permitió la identificación imparcial de las clases de células y su organización espacial dentro del tejido.
  • Se reveló la localización subcelular del ARNm y las interacciones ligando-receptor intercelulares.

Conclusiones:

  • SeqFISH+ es una potente tecnología para generar atlas de células espaciales.
  • Este método facilita los estudios basados en el descubrimiento de procesos biológicos in situ a nivel del transcriptoma.