El sesgo de conformación del ligando impulsa la modificación enantioselectiva de una lisina expuesta a la superficie...

Área de la Ciencia:

• Biología Química
• Biología estructural
• Descubrimiento de drogas

Sus antecedentes:

• La orientación de las lisinas expuestas superficialmente con inhibidores covalentes es difícil debido a la baja reactividad y la presencia generalizada.
• Los métodos existentes para aumentar las tasas de modificación covalente corren el riesgo de efectos fuera del objetivo al aumentar la reactividad electrofílica.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un método para aumentar la tasa de modificación covalente (k_inact) de los inhibidores dirigidos a la lisina, independientemente de la afinidad de unión o la electrophilicidad.
• Para lograr una modificación selectiva covalente de la proteína de choque térmico 90 (Hsp90) en Lys58.

Principales métodos:

• Diseñado y sintetizado un ligando no covalente con un vinculante quiral, conformacionalmente restringido.
• Se utilizó la química del fluoruro de arilsulfonilo para la modificación covalente dirigida.
• Se emplearon ensayos bioquímicos y cristalografía de alta resolución para estudiar las interacciones ligando-proteína.
• Investigó los efectos celulares de la modificación covalente selectiva de Hsp90.

Principales resultados:

• El enlazador diseñado permitió una modificación covalente rápida y enantioselectiva de Hsp90 en Lys58.
• Las estructuras cristalinas revelaron el mecanismo de enantioselectividad impulsado por la conformación del ligando.
• La orientación selectiva covalente del Hsp90 celular indujo una respuesta de choque térmico prolongada.
• El enfoque aceleró con éxito la modificación covalente de un residuo de lisina desafiante.

Conclusiones:

• Las restricciones conformacionales de los ligandos de ingeniería son una estrategia poderosa para mejorar las tasas de modificación covalente.
• Este método permite la detección selectiva de residuos de lisina poco reactivos en las superficies de las proteínas.
• Los resultados tienen implicaciones significativas para el desarrollo de inhibidores covalentes dirigidos.