Reconstitución completa y desorfanización de la policetida sintasa asociada a la nocardiosis de 3 MDa

Área de la Ciencia:

• Microbiología
• La bioquímica
• Química orgánica

Sus antecedentes:

• Las bacterias Nocardia causan nocardiosis, una infección humana grave.
• Estas bacterias poseen una poliquetida sintasa (PKS) de función desconocida.

Objetivo del estudio:

• Descubrir y dilucidar la estructura del policetido sintetizado por el Nocardia PKS.
• Para reconstituir la línea de ensamblaje no modular PKS *in vitro* y expresarla heterológicamente.

Principales métodos:

• Purificación de los componentes proteicos para la reconstitución in vitro de la NOCAP sintasa.
• Expresión heteróloga en E. coli y análisis espectroscópico de los productos.
• Elucidación de la estructura de la aglicona NOCAP.

Principales resultados:

• Reconstitución exitosa in vitro de una línea de ensamblaje de trans- aciltransferasa PKS.
• Descubrimiento y determinación estructural de la aglicona NOCAP sin precedentes.
• Identificación de una estructura única con un grupo de cabeza de resorcilaldehído y una cola de 15 carbonos.

Conclusiones:

• Este estudio representa la primera reconstitución exitosa *in vitro* de una línea de ensamblaje de *trans*- aciltransferasa PKS.
• Los hallazgos permiten la "deorfanización" de un PKS completo identificado a través de la secuenciación genómica.
• Comprender la estructura de NOCAP es crucial para investigar su papel en las infecciones de Nocardia.