Entrega de epítopos transmembranares mediante el enhebramiento pasivo de proteínas a través de los poros del Trimador de Porina OmpF

Área de la Ciencia:

• Transporte por la membrana externa de las bacterias
• Mecanismos de translocación de las proteínas
• Biofísica molecular

Sus antecedentes:

• Las membranas externas de las bacterias gramnegativas (OM) utilizan porinos trímero para la difusión de nutrientes y antibióticos.
• Las bacteriocinas, como ColE9, explotan estos canales de porina para la entrada celular a través de mecanismos poco conocidos.

Objetivo del estudio:

• Aclarar el mecanismo de importación pasiva del dominio de translocación intrínsecamente no estructurado N-terminal (IUTD) de la bacteriocina endonucleasa ColE9 a través de la OM de Escherichia coli a través de la porina OmpF.

Principales métodos:

• Registro eléctrico de un solo canal en las bicapas lipídicas planas.
• Técnicas de ingeniería de proteínas.
• Análisis cinético de una sola molécula.

Principales resultados:

• La importación de IUTD está impulsada por interacciones débiles y sesgadas orientalmente con los epítopos de unión de poros de OmpF.
• Más de 60 aminoácidos del hilo IUTD a través de dos subunidades OmpF.
• El IUTD entra desde el lado extracelular, se transloca al periplasma y se somete a un complejo proceso de reingreso y unión.

Conclusiones:

• Los procesos de transporte y unión crean un conjunto irreversible, como un gancho.
• Este ensamblaje restringe un epítopo de péptido activador de importación entre las subunidades de OmpF, detallando la translocación de bacteriocina.