Videos de Experimentos Relacionados
Producción de híbridosomas estables conejo-ratón que secretan conejo mAb de especificidad definida
1Allelix Inc., Diagnostics Division, Mississauga, Ontario, Canada.
Resumen
La inclusión del suero normal de conejo (NRS) en el medio de cultivo mejoró significativamente la producción de anticuerpos monoclonales específicos de conejo contra el estreptococo del grupo A (GAS). Este método produce hibridomas estables para una secreción prolongada de anticuerpos.
Área de la Ciencia:
- Inmunología Inmunología.
- Tecnología del hibridoma Tecnología del hibridoma.
Sus antecedentes:
- La tecnología del hibridoma es crucial para la producción de anticuerpos monoclonales.
- Los métodos anteriores para generar híbridos de conejo y ratón (RMH) tienen limitaciones en eficiencia y especificidad.
Objetivo del estudio:
- Investigar la eficacia del suero normal de conejo (NRS) para mejorar la producción de anticuerpos monoclonales de conejo (mAbs) contra el estreptococo del grupo A (GAS).
Principales métodos:
- Fusión interespecífica de células del bazo de conejo hiperinmunizadas con células de mieloma murino SP2/0.
- Suplementación del medio de cultivo con NRS durante las fases iniciales de fusión, clonación y estabilización.
- Cuantificación del anticuerpo de conejo específico de GAS secretado por líneas RMH estabilizadas.
Principales resultados:
- Se han producido con éxito 271 híbridosomas conejo-ratón (HRC) que secretan inmunoglobulina de conejo contra GAS.
- Se lograron líneas estabilizadas de RMH monoclonales que secretan anticuerpos de conejo específicos de GAS durante más de 4 meses in vitro.
- Las concentraciones de anticuerpos alcanzaron 38 μg/10^6 células/24 horas, comparables a los híbridosomas murinos.
Conclusiones:
- El suero normal de conejo (NRS) es un suplemento eficaz para la producción de anticuerpos monoclonales específicos de conejo (mAb) que secretan RMHs.
- Este método ofrece una mejora significativa con respecto a las técnicas reportadas anteriormente para generar RMHs.