AggFluor: La caja de herramientas fluorogénica permite la visualización directa del proceso de agregación de...

Área de la Ciencia:

• La bioquímica
• Biología celular
• Biología Química

Sus antecedentes:

• El mal plegamiento y la agregación de proteínas están relacionados con enfermedades incurables.
• Los métodos actuales carecen de la capacidad de diferenciar las conformaciones agregadas en células vivas.

Objetivo del estudio:

• Para presentar AggFluor, una caja de herramientas químicas para imágenes de células vivas y la diferenciación de las conformaciones de agregados de proteínas.
• Para permitir la obtención de imágenes en dos colores para distinguir los oligómeros solubles de los agregados insolubles.

Principales métodos:

• Desarrollo de AggFluor, una serie de fluoróforos de rotor molecular basados en cromóforos de proteínas fluorescentes verdes.
• Utilizando la fluorescencia diferencial basado en la sensibilidad a la viscosidad dentro de los agregados.
• Empleo de una estrategia de imágenes de doble color para el análisis de células vivas.

Principales resultados:

• Las sondas de AggFluor muestran fluorescencia diferencial en los oligómeros solubles frente a los agregados insolubles.
• Se estableció una nueva estrategia de imágenes de doble color para distinguir estas conformaciones.
• Se ha demostrado el uso de reguladores de la proteostasis para modular la formación y el desmontaje de agregados.

Conclusiones:

• AggFluor representa el primer conjunto racionalmente diseñado de fluoróforos de rotor molecular con una amplia sensibilidad a la viscosidad.
• Esta caja de herramientas avanza imágenes de células vivas de la agregación de proteínas.
• AggFluor puede aplicarse para estudiar otros procesos biológicos que implican cambios de viscosidad locales.