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La clonación molecular de ADN complementario humano y de rata que codifica los receptores de andrógenos
C S Chang1, J Kokontis, S T Liao
1Ben May Institute, University of Chicago, IL 60637.
Science (New York, N.Y.)
|April 15, 1988
Resumen
Los investigadores aislaron ADN complementario (ADNc) para los receptores de andrógenos de tejidos humanos y de ratas. La proteína resultante se une específicamente a los andrógenos, confirmando su función como receptor.
Área de la Ciencia:
- Biología Molecular Biología Molecular
- Endocrinología Endocrinología.
- Genética La genética.
Sus antecedentes:
- Los receptores de andrógenos (RA) son cruciales para el desarrollo y la función sexual masculina.
- Comprender la estructura y función de la AR es vital para estudiar los trastornos relacionados con los andrógenos.
- Investigaciones anteriores indicaron la existencia de AR, pero carecían de una caracterización molecular detallada.
Objetivo del estudio:
- Para aislar y caracterizar los ADN complementarios (ADNc) que codifican los receptores de andrógenos.
- Para confirmar las propiedades funcionales de la proteína expresa del receptor de andrógenos.
- Para analizar los dominios estructurales conservados dentro del receptor de andrógenos.
Principales métodos:
- Construcción y cribado de testículos humanos y bibliotecas de ADNc de próstata ventral de rata.
- Secuenciación de nucleótidos de ADNc aislados para deducir secuencias de aminoácidos.
- Transcripción in vitro y traducción libre de células del ARcDNA humano.
- Inmunoprecipitación utilizando anticuerpos autoinmunes contra el receptor de andrógenos.
- Pruebas de unión de andrógenos para evaluar la especificidad y la afinidad.
Principales resultados:
- Se obtuvieron con éxito ADNc codificando los receptores de andrógenos de tejidos humanos y de ratas.
- La secuencia de aminoácidos deducida reveló un dominio de unión al ADN rico en cisteína conservado, característico de los receptores de esteroides.
- La traducción in vitro produjo una proteína de 76 kilodaltones que fue inmunopreceptible por los anticuerpos anti-AR.
- La proteína expresada demostró una unión específica y de alta afinidad a los andrógenos.
Conclusiones:
- El estudio aisló y caracterizó con éxito el cDNA del receptor de andrógenos de humanos y ratas.
- La proteína expresada posee las características funcionales clave de un receptor de andrógenos específico de alta afinidad.
- Los hallazgos proporcionan una base molecular para comprender la función del receptor de andrógenos y su papel en los procesos biológicos.