Función in vivo de los elementos de Cis-ADN sensibles al flujo del gen eNOS: un papel para los mecanismos basados en...

Área de la Ciencia:

• Biología cardiovascular
• La epigenética
• Biología molecular

Sus antecedentes:

• La síntasa de óxido nítrico endotelial (eNOS) es crucial para la salud arterial, expresada predominantemente en áreas de flujo laminar.
• El flujo sanguíneo alterado reduce la transcripción de eNOS, contribuyendo a la aterosclerosis.
• El promotor eNOS contiene elementos sensibles al flujo (SSRE y KLF) cuyas funciones in vivo son desconocidas.

Objetivo del estudio:

• Investigar la función in vivo de los elementos de ADN cis sensibles al flujo en el promotor eNOS.
• Aclarar el papel de la metilación del ADN en la regulación eNOS dependiente del flujo.

Principales métodos:

• Se generaron ratones transgénicos de inserción con mutaciones en los elementos cis promotores eNOS.
• Se evaluó la expresión génica del referente y la metilación del ADN (secuenciación por bisulfito/pirosecuenciación) en las células endoteliales.
• Comparación de los resultados in vivo con los datos in vitro.

Principales resultados:

• La mutación SSRE abolió la expresión del reportero y causó hipermetilación del promotor, lo que indica su papel crítico.
• La mutación KLF condujo a la represión específica del sitio de integración y a la hipermetilación.
• Los ratones de tipo salvaje mostraron una expresión reducida y hipermetilación en regiones de ateroprono bajo flujo perturbado.
• La expresión de eNOS está regulada por la metilación de ADN in vivo dependiente del flujo y específica de la región.

Conclusiones:

• Los elementos SSRE y KLF son sensores de flujo esenciales para mantener un promotor eNOS hipometilado y transcripcionalmente permisivo.
• Los mecanismos epigenéticos dependientes del flujo, específicamente la metilación del ADN, regulan la expresión génica eNOS in vivo.
• Este estudio proporciona nuevos conocimientos mecanicistas sobre la regulación de eNOS y su papel en la aterogénesis.