MIC-Drop: una plataforma para las pantallas CRISPR in vivo a gran escala

Área de la Ciencia:

• La genética
• Biología del desarrollo
• La bioingeniería

Sus antecedentes:

• Las pantallas CRISPR-Cas9 son potentes en cultivos celulares, pero son un desafío en modelos animales debido a problemas de escalabilidad.
• La generación y el seguimiento de numerosos animales mutantes para las pruebas genéticas a gran escala es actualmente prohibitivo.
• Se necesitan métodos eficientes y escalables para las pruebas genéticas funcionales en organismos enteros.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar una plataforma escalable para las pantallas CRISPR a gran escala en peces cebra.
• Permitir la identificación de genes asociados con fenotipos morfológicos y de comportamiento.
• Facilitar el descubrimiento de nuevos genes involucrados en procesos biológicos y la identificación de objetivos farmacológicos.

Principales métodos:

• Se desarrolló la plataforma de gotas CRISPR multiplexadas y mezcladas (MIC-Drop).
• Combinación de microfluidos en gotas, inyección masiva de ribonucleoproteínas CRISPR y código de barras de ADN.
• Aplicación de MIC-Drop para las pruebas genéticas funcionales en peces cebra.

Principales resultados:

• MIC-Drop ha permitido exámenes CRISPR a gran escala en el pez cebra.
• La plataforma identificó eficientemente los genes responsables de los fenotipos morfológicos y conductuales específicos.
• Demostró la utilidad de MIC-Drop en la identificación de objetivos de moléculas pequeñas y el descubrimiento de nuevos genes en el desarrollo cardíaco.

Conclusiones:

• MIC-Drop es una plataforma escalable para pantallas genéticas inversas a escala de genoma en organismos modelo como el pez cebra.
• Esta tecnología supera las limitaciones anteriores en el cribado CRISPR basado en animales.
• MIC-Drop abre nuevas vías para comprender la función génica e identificar objetivos terapéuticos.