Construir conexiones genéticas endógenas a través de la función CRISPR / Cas9 controlada por autoensamblaje de ARN

Área de la Ciencia:

• Biología sintética
• Biología molecular
• Ingeniería genética

Sus antecedentes:

• Los circuitos sintéticos son cruciales para la ingeniería de comportamientos celulares mediante la creación de conexiones genéticas artificiales.
• Las cajas de herramientas de manipulación genética existentes carecen de generalidad y facilidad de diseño para diversos genes endógenos.

Objetivo del estudio:

• Presentar un nuevo circuito de ARN inducido por autoensamblaje para la manipulación directa de redes reguladoras de genes endógenos.
• Para demostrar un enfoque flexible y simple para la construcción de nuevas conexiones genéticas.

Principales métodos:

• Diseñó un circuito de ARN de autoensamblaje inspirado en el ensamblaje de ARN guía CRISPR / Cas9.
• Utilizó un ARN gatillo independiente para formar un conjunto de ARN guía ternario para el control de CRISPR/Cas9.
• Aplicó el sistema para la regulación de la expresión génica endógena en *E. coli* y células de mamíferos.

Principales resultados:

• Expresión génica endógena controlada con éxito utilizando ARN pequeños y ARNm en *E. coli* a través del circuito de ARN.
• Demostró la programación de fenotipos celulares mediante la introducción de nuevas conexiones genéticas.
• Validación de la funcionalidad del circuito de autoensamblaje de ARN en un sistema de mamíferos.

Conclusiones:

• El circuito de ARN de autoensamblaje ofrece un método flexible y simple para establecer conexiones genéticas endógenas.
• Este enfoque proporciona una herramienta poderosa para manipular las redes genéticas celulares.
• El diseño tiene amplias implicaciones para la biología sintética y las aplicaciones de ingeniería genética.