Sonda fluorescente de doble canal para el monitoreo simultáneo de peroxinitrito y adenosina-5'-trifosfato en...

Área de la Ciencia:

• Ingeniería biomédica
• Química analítica
• Biología celular

Sus antecedentes:

• Los niveles de trifosfato de adenosina (ATP) y peroxinitrito (ONOO) son biomarcadores críticos en varias enfermedades, incluida la isquemia por reperfusión y la lesión hepática inducida por medicamentos.
• La detección simultánea de ATP y ONOO- es un desafío pero crucial para comprender la fisiopatología celular.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar una nueva sonda fluorescente, ATP-LW, para la detección simultánea y distinta de ATP y ONOO-.
• Para validar la eficacia de la sonda en los experimentos de imágenes celulares.

Principales métodos:

• Diseño y síntesis de la sonda fluorescente ATP-LW.
• Caracterización de la respuesta de la sonda a ONOO- a través de la oxidación selectiva y ATP a través de la apertura del anillo inducida por la unión.
• Imágenes de fluorescencia de doble canal en hepatocitos (células HL-7702).

Principales resultados:

• ATP-LW reacciona selectivamente con ONOO- para producir una señal fluorescente verde (λex = 488 nm, λem = 500-575 nm).
• La unión de ATP a ATP-LW induce una señal fluorescente roja (λex = 514 nm, λem = 575-650 nm).
• Las imágenes celulares demostraron cambios distintos en los canales de fluorescencia verde y rojo correspondientes a niveles alterados de ATP y ONOO- tras el tratamiento con oligomicina A y SIN-1.

Conclusiones:

• ATP-LW sirve como una sonda fluorescente de doble canal versátil para la detección simultánea de ONOO y ATP.
• La sonda permite el monitoreo en tiempo real de los estados metabólicos y oxidativos celulares.
• Esta herramienta tiene aplicaciones potenciales en el estudio de enfermedades que implican niveles desregulados de ATP y ONOO-.