Ratones transgénicos que carecen selectivamente de la expresión del antígeno de la clase II (I-E) del CMH en las...

Área de la Ciencia:

• Inmunogenética La inmunogenética.
• Biología Molecular Biología Molecular
• Modelos de animales transgénicos.

Sus antecedentes:

• El gen E alfa es un componente crítico de la molécula MHC clase II, esencial para la activación de las células T.
• Comprender los elementos reguladores que controlan la expresión del gen E alfa es vital para la investigación del sistema inmunológico.
• Estudios previos han identificado regiones reguladoras dentro de las secuencias 5' flanqueantes de los genes MHC clase II.

Objetivo del estudio:

• Para investigar el papel de las secuencias de flanqueo 5' en la expresión específica del tejido del gen E alfa.
• Determinar los elementos reguladores mínimos requeridos para la expresión de E alfa en los linfocitos B.
• Para analizar el impacto de las modificaciones de la construcción transgénica en los patrones de expresión génica E alfa y la tolerancia inmune.

Principales métodos:

• Generación de ratones transgénicos portadores del gen E alfa MHC clase II con secuencias de flanqueo definidas de 5' y 3'.
• Análisis de la expresión transgénica en varios tejidos (timo, bazo, células de exudado peritoneal) utilizando técnicas moleculares.
• Evaluación de la inducción de tolerancia inmune en ratones transgénicos a través de experimentos de respuesta de leucocitos mixtos.

Principales resultados:

• La expresión transgénica se observó en el tejido tímico y las células adherentes del bazo, e inducible en las células del exudado peritoneal por interferón gamma.
• La expresión del transgeno E alfa estuvo notablemente ausente en los linfocitos B, a diferencia del gen endógeno.
• La eliminación de las secuencias de flanqueo 5' entre -1.4 kb y -2 kb pareció inactivar los elementos reguladores específicos de las células B.
• La presencia de ADN pBR327 vinculado al transgen suprimió la expresión periférica, lo que resultó en la expresión solo del timo y la tolerancia inducida a I-E.

Conclusiones:

• La región 5' flanqueante del gen E alfa contiene elementos reguladores críticos para la expresión específica de los linfocitos B.
• Las deleciones específicas dentro de la secuencia de flanqueo de 5' pueden abolir la expresión alfa E en las células B.
• El constructo transgénico E alfa y sus elementos asociados influyen tanto en los patrones de expresión génica como en la inducción de la tolerancia inmune.