Múltiples codones AUG aguas arriba median el control traslacional de GCN4.

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Genética de la levadura Genética de la levadura
• Regulación genética Reglamento genético.

Sus antecedentes:

• GCN4 es un activador transcripcional de levadura para la biosíntesis de aminoácidos.
• Su expresión está controlada principalmente a nivel de la traducción.
• El líder 5' del ARNm GCN4 contiene elementos reguladores.

Objetivo del estudio:

• Investigar el papel de los marcos de lectura abierta (uORF) en la regulación traslacional de GCN4.
• Para determinar la contribución específica de cada codón de iniciación uORF al control traslacional.
• Para dilucidar el mecanismo de regulación de GCN4 bajo condiciones de inanición.

Principales métodos:

• Mutagénesis dirigida al sitio de los codones de iniciación dentro de las uORFs 5' líderes de GCN4 5'.
• Análisis de la eficiencia de traducción del ARNm GCN4 en cepas de levadura con uORFs mutados.
• Evaluación de los niveles de expresión de GCN4 bajo disponibilidad variable de aminoácidos.

Principales resultados:

• Los cuatro uORF son esenciales para la represión traslacional del GCN4.
• Los dos uORF 3' proximales exhiben efectos inhibidores más fuertes que los uORF 5' proximales.
• El primer uORF se requiere inesperadamente para la expresión eficiente de GCN4 durante la inanición de aminoácidos, antagonizando los uORF inhibidores.

Conclusiones:

• La traducción de GCN4 de la levadura está finamente sintonizada por una compleja interacción de cuatro uORF.
• Los diferentes roles inhibidores de los uORF y una función reguladora positiva del primer uORF son críticos para la expresión génica adaptativa.
• Los factores GCN2 y GCD1 modulan las interacciones uORF en respuesta al estado nutricional.