La homología homoeo-dominio en la levadura MAT alfa 2 es esencial para la actividad represora

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Genética de la levadura Genética de la levadura
• El Reglamento de transcripción es el Reglamento de transcripción.

Sus antecedentes:

• El locus alfa MAT en Saccharomyces cerevisiae codifica las proteínas reguladoras alfa 1 y alfa 2, que determinan el tipo de célula.
• MAT alfa 2 actúa como un regulador negativo de genes a-específicos y contribuye a la determinación del tipo de célula diploide.
• La proteína MAT alfa 2 se une al ADN aguas arriba de un gen específico, lo que sugiere un control de la transcripción.

Objetivo del estudio:

• Para investigar la base molecular de la interacción con el ADN de la proteína MAT alfa 2.
• Para determinar la importancia funcional de la homología entre MAT alfa 2 y las estructuras conocidas de unión al ADN.
• Para identificar los residuos de aminoácidos esenciales para las actividades represoras de MAT alfa 2.

Principales métodos:

• Mutagenesis por saturación del segmento de proteína MAT alfa 2 homólogo a las estructuras de unión al ADN de los procariotas y a los homeodomaines eucariotas.
• Ensayos de unión del ADN in vitro. ensayos de unión del ADN in vitro.
• Análisis de las actividades represoras en genes a-específicos y haploides-específicos.

Principales resultados:

• La mayoría de los residuos de aminoácidos en el MAT alfa 2 correspondientes a regiones conservadas en las proteínas de unión al ADN de los procariotas y los homeodomaines son esenciales para las funciones represoras.
• Las mutaciones en un subconjunto de estos residuos afectan de manera desproporcionada la represión de genes específicos de a en comparación con los genes específicos de haploides.
• Esto pone de relieve la importancia de los residuos específicos para la regulación diferencial de genes por MAT alfa 2.

Conclusiones:

• Los residuos de aminoácidos conservados dentro del MAT alfa 2 son críticos para sus actividades de unión al ADN y de represor de la transcripción.
• El estudio aclara la base estructural para el papel de MAT alfa 2 en la determinación del tipo de célula de la levadura.
• Los diferentes efectos de las mutaciones sugieren mecanismos distintos o afinidades de unión para regular diferentes genes diana.