Cuantificación de fármacos dentro de la célula por polarización nuclear dinámica de giro de ángulo mágico RMN

Área de la Ciencia:

• La biofísica
• Farmacología
• La bioquímica

Sus antecedentes:

• La medición precisa de la concentración intracelular del fármaco es crucial para comprender la función y la eficacia del fármaco.
• Las técnicas experimentales actuales luchan por cumplir con los requisitos para el análisis no destructivo, sensible y cuantitativo de fármacos intracelulares.
• La detección de fármacos en bajas concentraciones micromolares a nanomolares (picomoles a femtomoles por millón de células) sigue siendo un desafío significativo.

Objetivo del estudio:

• Demostrar la utilidad de la polarización nuclear dinámica giratoria de ángulo mágico (MAS DNP) para cuantificar las concentraciones intracelulares de fármacos.
• Establecer un método no destructivo para medir las cantidades de fármaco dentro de las células sin modificar el fármaco o el objetivo.
• Para lograr una detección sensible de las moléculas intracelulares del fármaco en el rango de picomoles a femtomoles.

Principales métodos:

• Aplicación de un enfoque cuantitativo 15N MAS DNP.
• Utilizando el etiquetado 15N de la molécula del fármaco para una detección mejorada.
• Medición de las cantidades intracelulares de fármaco de [15N]CHIR-98014, un activador de la vía de señalización Wnt.

Principales resultados:

• Cuantificación exitosa de las cantidades intracelulares de fármaco utilizando DNP de MAS.
• Determinación de los niveles intracelulares del fármaco para [15N]CHIR-98014 en el intervalo de decenas a cientos de picomoles por millón de células.
• Demostrar la capacidad del MAS DNP para cumplir los requisitos de medición sensible, cuantitativa y no destructiva de las concentraciones de drogas.

Conclusiones:

• La polarización nuclear dinámica giratoria de ángulo mágico (MAS DNP) es una técnica viable para cuantificar las concentraciones intracelulares de fármacos.
• Este estudio representa la primera aplicación exitosa del MAS DNP para la estimación de las cantidades intracelulares de fármaco.
• El método desarrollado ofrece un enfoque no destructivo y sensible para el análisis de la concentración de fármacos, lo que ayuda en el descubrimiento y desarrollo de fármacos.