Ablación del desarrollo de cDC2 por mutaciones triples dentro del potenciador de Zeb2

Área de la Ciencia:

• Inmunología
• Biología del desarrollo
• Reglamento de transcripción

Sus antecedentes:

• Las vías de diferenciación de los progenitores de células dendríticas comunes (CDP) en linajes cDC1 y cDC2 no se comprenden completamente.
• Si bien se sabe que los factores de transcripción como BATF3 estabilizan las etapas posteriores del compromiso de cDC1, los mecanismos iniciales que impulsan la divergencia de CDP siguen siendo escurridizos.

Objetivo del estudio:

• Elucidar los mecanismos de transcripción que rigen la divergencia de los progenitores de células dendríticas comunes (CDP).
• Identificar los requisitos iniciales para la especificación de las celdas pre-cDC2.

Principales métodos:

• Análisis de ratones reporteros de NFIL3 para hacer un seguimiento de la dinámica de expresión de NFIL3.
• CUT&RUN y ChIP-seq para identificar los sitios de unión endógenos de NFIL3.
• CRISPR-Cas9 mediado en el análisis mutacional in vivo de los elementos reguladores identificados.
• Evaluación del desarrollo de células dendríticas y de las respuestas de las células T auxiliares 2 en ratones mutantes.

Principales resultados:

• NFIL3 se une transitoriamente al potenciador Zeb2, donde compite con C/EBPα y C/EBPβ.
• NFIL3 actúa como un represor, mientras que los C/EBP actúan como soportes de la expresión de Zeb2 en estos sitios.
• La alteración de los sitios de unión NFIL3-C/EBP conduce a la pérdida de la expresión de Zeb2 en los progenitores mieloides.
• Esto da como resultado un fracaso completo de la especificación pre-cDC2 y el desarrollo maduro de la cDC2, deteriorando las respuestas del T-helper 2.

Conclusiones:

• La divergencia de CDP en linajes cDC1 y cDC2 está regulada por un mecanismo competitivo en el potenciador Zeb2 que involucra a NFIL3 y C/EBP.
• Este eje regulador es esencial para el desarrollo de las cDC2 y su función en la orquestación de las respuestas inmunes del T-helper 2.