La nano luciferasa emisora de ámbar y su uso para imágenes de inmunobioluminiscencia en vivo

Área de la Ciencia:

• La bioquímica
• Biología molecular
• Imágenes biomédicas

Sus antecedentes:

• La luciferasa NanoLuc (NLuc) y la furimazina (FRZ) son esenciales para los ensayos de bioluminiscencia (BL).
• La baja penetración en el tejido de los fotones azules de NLuc-FRZ limita las imágenes del tejido de los mamíferos.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un nuevo mutante de NLuc (QLuc) para la emisión de bioluminiscencia con desplazamiento al rojo.
• Mejorar la penetración en los tejidos profundos para mejorar las imágenes in vivo.
• Establecer un método de imágenes de inmunobioluminiscencia *in vivo* (immunoBLI) utilizando QLuc.

Principales métodos:

• Diseñado NLuc mutante QLuc para la emisión desplazada hacia el rojo (∼585 nm) utilizando luciferina sintética QTZ.
• Evaluación del rendimiento de QLuc para imágenes de tejidos profundos en ratones vivos.
• InmunoBLI desarrollado utilizando una proteína de fusión QLuc-scFv para atacar antígenos tumorales en un modelo de xenotransplante.

Principales resultados:

• QLuc demostró una emisión brillante y desplazada al rojo, superando a otros mutantes de NLuc para imágenes de tejidos profundos.
• La proteína de fusión QLuc-scFv permitió una imagen molecular exitosa de antígenos asociados al tumor.
• QLuc representa una de las variantes de NLuc con mayor desplazamiento al rojo disponibles.

Conclusiones:

• QLuc ofrece un rendimiento mejorado para imágenes no invasivas de mamíferos, particularmente en tejidos profundos.
• El método immunoBLI proporciona una alternativa no radioactiva para la imagen molecular en la investigación preclínica.
• Se espera que QLuc tenga amplias aplicaciones en imágenes de bioluminiscencia y campos relacionados.