El mecanismo de la limitación del ARN por el SARS-CoV-2

Área de la Ciencia:

• Virología
• Biología molecular
• Biología estructural

Sus antecedentes:

• El genoma de ARN del SARS-CoV-2 requiere una tapa de 5' para la traducción, la estabilidad y la evasión inmune.
• El mecanismo preciso de la formación de la capa de ARN del SARS-CoV-2 por las proteínas virales no estaba claro anteriormente.

Objetivo del estudio:

• Para aclarar el proceso paso a paso de la síntesis de la capa de ARN del SARS-CoV-2.
• Identificar las proteínas virales no estructurales (nsps) involucradas en el encapsulamiento del ARN.
• Para explorar el potencial del mecanismo de tapa como un objetivo antiviral.

Principales métodos:

• Reconstitución de la capa de ARN del SARS-CoV-2 N7- y 2'-O-metilado (7MeGpppA2'-O-Me) in vitro.
• Utilizando proteínas no estructurales codificadas viralmente (nsps), incluidas las nsp12, nsp9, nsp14 y nsp16.
• Utilizando análisis estructurales del complejo de replicación-transcripción y un sistema de genética inversa.

Principales resultados:

• El dominio de la nucleotidiltransferasa asociada al nidovirus RdRp (NiRAN) de nsp12 media la ARNilación de nsp9, formando un intermediario de ARN-proteína covalente.
• El dominio NiRAN transfiere el ARN al PIB, creando la estructura de la tapa del núcleo GpppA-RNA.
• La metilación por nsp14 y nsp16 produce la tapa funcional; el nsp9 N-terminal y el sitio activo de NiRAN son cruciales para la replicación.

Conclusiones:

• El SARS-CoV-2 emplea un mecanismo de cierre de ARN no convencional que involucra una serie de nsps.
• La vía de cierre de ARN identificada presenta un nuevo objetivo para el desarrollo de fármacos antivirales contra COVID-19.