Ácidos nucleicos esféricos CRISPR

Área de la Ciencia:

• Biotecnología
• Biología molecular
• Nanotecnología

Sus antecedentes:

• La eficiencia de la edición del genoma CRISPR/Cas9 se ve obstaculizada por los desafíos en la entrega de componentes en células y tejidos.
• Los ácidos nucleicos esféricos (SNA) ofrecen potencial para una mayor absorción celular, pero no se han aplicado a la edición de genes.

Objetivo del estudio:

• Diseñar y evaluar una nueva clase de SNA CRISPR para mejorar la edición del genoma.
• Para mejorar la entrega celular y la localización nuclear de los componentes de CRISPR-Cas9.

Principales métodos:

• Cas9 ProSNAs sintetizados: núcleos de proteínas Cas9 densamente modificados con exteriores de ADN, precargados con ARN guía.
• Los péptidos GALA incorporados y las señales de localización nuclear mejoran el escape endosómico y la orientación nuclear.
• Se evaluó la estabilidad frente a la digestión de la proteasa y se evaluó la eficiencia de la edición del genoma en múltiples líneas celulares.

Principales resultados:

• Cas9 ProSNAs demostró una mayor absorción celular sin electroporación o agentes de transfección.
• Las construcciones mostraron estabilidad frente a la degradación de la proteasa.
• Logró eficiencias de edición del genoma que van desde el 32% hasta el 47% en diferentes líneas celulares.

Conclusiones:

• Los nuevos SNAs CRISPR (Cas9 ProSNAs) superan las principales barreras de entrega para la edición del genoma.
• Estas nanoestructuras mejoran significativamente la absorción celular y la eficiencia de edición.
• Este avance tiene el potencial de ampliar las aplicaciones y el impacto de la tecnología CRISPR-Cas9.