Ionización de electrospray nativo de proteínas de múltiples dominios a través de un mecanismo de eyección de cuentas

Área de la Ciencia:

• Caracterización biofísica
• Espectrometría de masas
• Ciencias de las proteínas

Sus antecedentes:

• La espectrometría de masas de movilidad iónica nativa (IM-MS) analiza la conformación de la solución proteica a través de las distribuciones de carga y colisión en la sección transversal.
• Las proteínas terapéuticas a menudo presentan estructuras de múltiples dominios con enlaces desordenados, lo que presenta desafíos analíticos complejos.

Objetivo del estudio:

• Investigar la carga y la conformación de la fase gaseosa de las proteínas terapéuticas de múltiples dominios utilizando el IM-MS.
• Para aclarar el mecanismo de ionización de estas estructuras complejas de proteínas durante la ionización por electrospray.

Principales métodos:

• Espectrometría de masas de movilidad iónica nativa (IM-MS).
• Intercambio de hidrógeno y deuterio en solución (HDX).
• Análisis de las distribuciones transversales de carga y colisión.

Principales resultados:

• Las distribuciones multimodales de la carga y la sección transversal de colisión indican múltiples conformaciones de la solución.
• El intercambio de hidrógeno y deuterio en solución confirmó la presencia de diversas conformaciones.
• Se propuso un mecanismo de ionización híbrido, denominado "ejección de perlas", para explicar la ionización de estructuras que no siguen los modelos estándar.

Conclusiones:

• Las proteínas de múltiples dominios exhiben conformaciones complejas de solución detectables por IM-MS.
• El "mecanismo de eyección de perlas" ofrece una nueva explicación para la ionización de biomoléculas en electrospray.
• Este mecanismo puede ser un principio general para la ionización por electrospray de varias biomoléculas.