Identificación de los reguladores astrocíticos por citometría de ácido nucleico

Área de la Ciencia:

• La neurociencia
• Inmunología
• La genómica

Sus antecedentes:

• La esclerosis múltiple (EM) es una enfermedad inflamatoria crónica del sistema nervioso central (SNC).
• Los astrocitos, las células gliales del SNC, contribuyen a la patogénesis de la EM, pero sus subconjuntos son poco conocidos debido a la falta de marcadores de superficie únicos.
• La identificación y el análisis de subconjuntos de astrocitos patógenos raros es crucial para comprender la EM y desarrollar terapias.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un nuevo método para el análisis transcriptómico de alto rendimiento de poblaciones celulares raras y específicas.
• Investigar el papel de la proteína de unión a la caja X 1 (XBP1) en las respuestas de los astrocitos en la EM y su modelo animal.
• Identificar nuevos reguladores de las respuestas de los astrocitos patógenos en la EM.

Principales métodos:

• Interrogación enfocada de células por detección y secuenciación de ácido nucleico (FIND-seq): un método microfluídico que combina encapsulación celular, PCR y clasificación por gotas para transcriptómica de una sola célula.
• Aplicación de FIND-seq para el estudio de astrocitos regulados por XBP1 en muestras experimentales de encefalomielitis autoinmune (EAE) en ratones y de EM en humanos.
• Integración con ratones con knockout condicional, perturbaciones genéticas CRISPR-Cas9 y secuenciación de ARN a granel o de una sola célula.

Principales resultados:

• FIND-seq permitió con éxito el análisis transcriptómico en profundidad de células raras con resolución de una sola célula.
• Se identificó una función previamente desconocida para el receptor nuclear NR3C2 y su corepressor NCOR2.
• Se ha demostrado que NR3C2 y NCOR2 limitan las respuestas de los astrocitos patógenos impulsados por XBP1 en la EM.

Conclusiones:

• FIND-seq es una herramienta poderosa para investigar subconjuntos de células raras previamente inaccesibles.
• La vía NR3C2-NCOR2 representa un nuevo mecanismo terapéutico dirigido para limitar la actividad patógena de los astrocitos en la EM.
• Este estudio avanza en la comprensión de la heterogeneidad de los astrocitos y su papel en las enfermedades inflamatorias del SNC.