Luciferinas de cumarina desplazadas hacia el rojo para mejorar las imágenes de bioluminiscencia

Área de la Ciencia:

• La bioquímica
• Biología molecular
• Imágenes biomédicas

Sus antecedentes:

• Las imágenes de bioluminiscencia multicomponente en vivo requieren una gama más amplia de sondas penetrantes en los tejidos.
• Las sondas existentes pueden tener limitaciones en el rango espectral o la compatibilidad para aplicaciones multiplexadas.

Objetivo del estudio:

• Para generar una nueva clase de análogos de la cumarina luciferina que emiten en el infrarrojo cercano (NIR) (CouLuc-3s).
• Para desarrollar luciferasas mutantes complementarias para estas nuevas sondas.
• Para permitir la obtención de imágenes sensibles y multiplexadas de bioluminiscencia in vivo.

Principales métodos:

• Análogos de cumarina luciferina (CouLuc-3s) sintetizados a partir de tintes disponibles en el mercado.
• Identificado y caracterizado luciferasas mutantes compatibles con las sondas CouLuc-3.
• Brillo evaluado de la sonda y sensibilidad de la imagen in vivo.
• Evaluó la ortogonalidad de los andamios CouLuc-3 con los reporteros bioluminiscentes existentes.

Principales resultados:

• Se ha generado con éxito una nueva clase de análogos de la cumarina luciferina emisores de NIR (CouLuc-3s).
• Se identificaron luciferasas mutantes adecuadas para los análogos de CouLuc-3.
• Se ha demostrado la sensibilidad de las imágenes in vivo utilizando las sondas más brillantes.
• Confirmó la ortogonalidad de los andamios CouLuc-3 para imágenes multicomponentes.

Conclusiones:

• Los análogos desarrollados de CouLuc-3 representan una valiosa adición al conjunto de herramientas para la obtención de imágenes por bioluminiscencia.
• Estas sondas facilitan aplicaciones de imágenes sensibles y multiplexadas in vivo.
• Las nuevas herramientas bioluminiscentes son fácilmente implementables en varios entornos de investigación biológica.