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Updated: Jun 22, 2026

10:41
Visualizing Protein Kinase A Activity In Head-fixed Behaving Mice Using In Vivo Two-photon Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy
Published on: June 7, 2019
8.5K
Imágenes de fluorescencia de campo amplio de la actividad neuronal y subumbral in vivo
Adam J Bowman1, Cheng Huang2, Mark J Schnitzer2,3,4
1Physics Department, Stanford University, Stanford, CA 94305, USA.
Resumen
Desarrollamos el microscopio de imagen de fluorescencia electro-óptica de por vida (EO-FLIM) para imágenes de voltaje rápidas y sensibles en neurociencia. Esta técnica captura la actividad eléctrica neural, incluidos los potenciales de acción, en moscas vivas con alta resolución espacial y temporal.
Área de la Ciencia:
- La neurociencia
- La biofísica
- Microscopía
Sus antecedentes:
- Las imágenes de fluorescencia a lo largo de la vida (FLIM) ofrecen potencial para el monitoreo de la actividad eléctrica biológica.
- Los métodos FLIM actuales carecen de la velocidad y la sensibilidad para las imágenes de voltaje neural en tiempo real.
Objetivo del estudio:
- Desarrollar y validar un nuevo sistema de microscopía de imagen por fluorescencia electro-óptica de campo amplio (EO-FLIM).
- Para lograr tasas de adquisición de fotogramas en kilohertz para imágenes de alta velocidad en neurociencia.
Principales métodos:
- Se utilizó el microscopio de imagen de fluorescencia electro-óptica de campo amplio (EO-FLIM).
- Resolución de vida útil de menos de 5 picosegundos a velocidades de cuadro de 1 kHz para grabaciones de tensión de una sola célula.
- Actividad neuronal registrada en adultos vivos *Drosophila*.
Principales resultados:
- Propagación del potencial de acción con resolución espacial y actividad neuronal subumbral.
- Se ha demostrado una alta sensibilidad y rechazo al movimiento y al ruido técnico.
- Se observaron despolarizaciones transmembranales locales y dos tipos de picos con distintas vidas de fluorescencia.
- Se muestra el bloqueo de fase de los picos neuronales a un estímulo mecánico externo.
Conclusiones:
- EO-FLIM permite imágenes de alta velocidad y alta resolución en sistemas biológicos.
- Esta técnica supera las limitaciones de los métodos existentes para aplicaciones de neurociencia.
- FLIM es una lectura viable para señales eléctricas rápidas en circuitos neuronales.

