RHINO dirige MMEJ para reparar las rupturas de ADN en la mitosis

Área de la Ciencia:

• Biología molecular
• La genética
• Investigación del cáncer

Sus antecedentes:

• Las rupturas de doble cadena de ADN (DSB) se reparan principalmente por unión final no homóloga (NHEJ) y recombinación homóloga (HR) durante la interfase.
• La unión final mediada por microhomología (MMEJ) se consideró una vía secundaria de reparación del ADN.
• El complejo 9-1-1 (RAD9A-RAD1-HUS1) y RHINO están implicados en la respuesta al daño del ADN.

Objetivo del estudio:

• Identificar nuevos factores implicados en la reparación del ADN por unión terminal mediada por microhomología (MMEJ).
• Aclarar los mecanismos reguladores que controlan el MMEJ durante el ciclo celular.
• Explorar las implicaciones terapéuticas de la orientación de la vía MMEJ en el cáncer.

Principales métodos:

• Se emplearon pantallas letales sintéticas basadas en CRISPR-Cas9 en las células cancerosas.
• Se utilizaron ensayos de inmunofluorescencia y co-inmunoprecipitación para estudiar la localización de proteínas e interacciones.
• Análisis de la actividad de MMEJ en diferentes fases del ciclo celular.

Principales resultados:

• Se identificaron las subunidades del complejo 9-1-1 y RHINO como factores esenciales del MMEJ.
• RHINO restringe la MMEJ a la mitosis, acumulándose y sometida a fosforilación por PLK1 durante la fase M.
• RHINO facilita el reclutamiento de la polimerasa θ (Polθ) a las DSB en mitosis, reparando las DSB inducidas por la fase S persistentes.

Conclusiones:

• RHINO juega un papel crítico en la regulación dependiente del ciclo celular de MMEJ.
• El MMEJ en mitosis repara los DSB residuales, destacando su importancia más allá de un mecanismo de respaldo.
• Los hallazgos proporcionan información sobre la letalidad sintética que involucra a POLQ, BRCA1 / 2 y la eficacia de los inhibidores de Polθ y PARP.