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Secuencia y expresión del ADN complementario del receptor de estrógeno humano.

G L Greene, P Gilna, M Waterfield

    Science (New York, N.Y.)
    |March 7, 1986
    PubMed
    Resumen

    Los investigadores expresaron un receptor de estrógeno humano funcional (ER) en las células, confirmando su identidad y estructura. Este hallazgo proporciona información sobre cómo los receptores de hormonas esteroides regulan la expresión génica y sus orígenes evolutivos.

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    Área de la Ciencia:

    • Biología Molecular Biología Molecular
    • Genética La genética.
    • Endocrinología Endocrinología.

    Sus antecedentes:

    • Los mecanismos precisos de la regulación del gen del receptor de la hormona esteroide en los eucariotas siguen sin estar claros.
    • La función del receptor de estrógenos (ER) es crítica en los procesos celulares, incluido el desarrollo del cáncer de mama.

    Objetivo del estudio:

    • Clonar, secuenciar y expresar un receptor de estrógeno humano funcional (ER) en una línea celular no humana.
    • Caracterizar la proteína ER expresada e investigar sus propiedades estructurales y funcionales.
    • Explorar las relaciones evolutivas entre ER y otras proteínas relacionadas.

    Principales métodos:

    • Secuenciación de un clon de ADN complementario (ADNc) que codifica la porción traducida completa del ARNm ER humano de las células de cáncer de mama MCF-7.

    Videos de Experimentos Relacionados

  • Expresión del cDNA ER en las células del ovario del hámster chino (CHO-K1) para producir una proteína funcional.
  • Caracterización bioquímica que incluye ensayos de unión al [3H]estradiol, sedimentación del gradiente de sacarosa y confirmación de anticuerpos monoclonales.
  • Comparación de la secuencia de aminoácidos con otros receptores de esteroides y productos oncogénicos.

    • Principales resultados:

    • Una proteína ER humana funcional fue expresada con éxito en las células CHO-K1.
    • La proteína expresada exhibió propiedades específicas de unión [3H]estradiol y propiedades de sedimentación características (4S en sal, 8-9S sin sal).
    • El análisis de anticuerpos monoclonales confirmó la identidad de la proteína expresada como ER humana.
    • Se identificó una homología regional significativa entre la ER humana, el receptor glucocorticoide humano y el producto oncogénico v-erbA, particularmente en una región rica en cisteína, lisina y arginina.

    Conclusiones:

    • El estudio produjo y caracterizó con éxito un receptor de estrógeno humano funcional en un sistema de expresión heterólogo.
    • Los hallazgos apoyan la hipótesis de que los genes de los receptores de esteroides y el oncogén v-erbA comparten un origen evolutivo común.
    • Se propone que la región homóloga identificada sea el dominio de unión al ADN para estas proteínas relacionadas.