Transcripción in vitro específica del tejido desde el promotor de albúmina del ratón

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Reglamento genético Reglamento genético.
• La bioquímica es la bioquímica.

Sus antecedentes:

• Se utilizaron extractos nucleares de hígado, cerebro y bazo de ratas para estudiar la transcripción génica.
• El promotor tardío principal del adenovirus-2 sirvió como control para la actividad general de la ARN polimerasa II.

Objetivo del estudio:

• Para identificar las secuencias de ADN responsables de la transcripción génica específica del hígado.
• Investigar el papel de regiones promotoras específicas del gen de la albúmina en la conferencia de la expresión específica del tejido.

Principales métodos:

• Preparación de extractos nucleares transcripcionalmente activos a partir de tejidos de ratas.
• En ensayos de transcripción in vitro se utilizan diferentes promotores de genes (adenovirus-2 mayor tardío, albúmina de ratón y Amy-1).
• Mutagénesis de eliminación e inserción de la región promotora del gen de la albúmina del ratón (-170 a -55).

Principales resultados:

• El promotor del gen de la albúmina del ratón mostró actividad significativa sólo en extractos de núcleos hepáticos.
• La eliminación de secuencias entre -170 y -55 en el promotor de albúmina causó una reducción de ~100 veces en la transcripción específica hepática.
• La inserción de estas secuencias de albúmina aguas arriba del promotor de Amy-1 mal transcrito mejoró su actividad en extractos hepáticos.

Conclusiones:

• Las secuencias específicas de ADN dentro de la región -170 a -55 del promotor del gen de la albúmina del ratón son esenciales para la transcripción específica del hígado.
• Estas secuencias reguladoras pueden conferir actividad transcripcional específica del hígado a promotores heterólogos.