La clonación y la expresión en Escherichia coli del gen para el factor de necrosis tumoral humana

Área de la Ciencia:

• Inmunología Inmunología.
• Biología Molecular Biología Molecular
• La bioquímica es la bioquímica.

Sus antecedentes:

• El factor de necrosis tumoral (TNF) se descubrió inicialmente en suero de ratón después de la administración de endotoxina.
• El TNF demuestra una citotoxicidad selectiva hacia las líneas celulares transformadas mientras ahorra las células normales.
• Este factor está implicado en la inducción de la necrosis tumoral in vivo.

Objetivo del estudio:

• Para caracterizar las propiedades del TNF.
• Para identificar el gen que codifica el TNF.
• Para expresar y purificar el TNF recombinante para la evaluación terapéutica.

Principales métodos:

• Purificación del TNF de conejo utilizando SDS-PAGE y filtración en gel.
• Caracterización de la masa molecular y el punto isoeléctrico del TNF purificado.
• Identificación del gen TNF humano a través del cribado de la biblioteca de ADN y su expresión en E. coli.

Principales resultados:

• El TNF de conejo purificado mostró una masa molecular de aproximadamente 40.000 Da (filtración por gel) y 17.000 Da (SDS-PAGE).
• La sustancia purificada exhibió tanto citotoxicidad in vitro como actividad necrótica in vivo.
• Se purificó el TNF humano recombinante producido en E. coli y se demostró actividad de necrosis tumoral.

Conclusiones:

• El TNF es un mediador clave de los efectos citotóxicos y necróticos.
• El gen que codifica el TNF ha sido identificado y expresado con éxito.
• El TNF recombinante es prometedor como agente terapéutico para el tratamiento del cáncer.