El análisis in situ revela el ciclo de trabajo TRiC y PDCD5 como un cofactor de estado abierto

Área de la Ciencia:

• Biología celular
• Biología estructural
• La bioquímica

Sus antecedentes:

• El complejo de anillos de proteínas del complejo T (TRiC), también conocido como chaperonina que contiene TCP-1 (CCT), es una máquina de plegado de proteínas dependiente de ATP esencial para la homeostasis celular.
• La disfunción de TRiC está implicada en varias enfermedades, incluidos el cáncer y los trastornos neurodegenerativos.
• El mecanismo preciso de acción de TRiC en las células sigue siendo en gran medida indefinido.

Objetivo del estudio:

• Para aclarar la arquitectura estructural, la dinámica conformacional y la organización espacial de TRiC dentro de las células humanas.
• Para reconstruir el ciclo funcional de TRiC en su entorno celular nativo.
• Identificar los interactores TRiC y comprender su papel en su función.

Principales métodos:

• Se empleó la tomografía criolectrónica para lograr un análisis estructural de alta resolución de TRiC in situ.
• Se resolvieron los estados conformacionales, incluidos los estados abiertos, cerrados, ligados al sustrato y asociados a pre-doblado.
• Se investigaron las interacciones proteína-proteína, específicamente con la PDCD5.

Principales resultados:

• Se identificaron estados TRiC abiertos y cerrados distintos, incluidas las formas ligadas al sustrato, y se determinó su abundancia relativa.
• Se observó que los TRiC cerrados que contienen sustrato forman grupos distintos, lo que sugiere una organización espacial dentro de la célula.
• La proteína de muerte celular programada 5 (PDCD5) fue identificada como un interactor específico que se une a los estados abiertos de TRiC.

Conclusiones:

• TRiC opera a una ocupación casi completa para facilitar el plegamiento de proteínas recién sintetizadas dentro de las células.
• El ciclo de trabajo de TRiC identificado y su organización espacial proporcionan un marco para comprender su papel en la homeostasis celular.
• Esta investigación sienta las bases para comprender la participación de TRiC en el cáncer y las enfermedades neurodegenerativas.