Desdoblamiento y compactación inducidos por la temperatura del citocromo c en las mismas soluciones acuosas

Área de la Ciencia:

• La bioquímica
• Biología estructural
• Química Física

Sus antecedentes:

• Los métodos convencionales para medir las temperaturas de fusión de las proteínas a menudo simplifican el despliegue a un modelo de dos estados.
• Comprender los cambios conformacionales de las proteínas a temperaturas elevadas es crucial para varios procesos biológicos.

Objetivo del estudio:

• Investigar el despliegue inducido térmicamente del citocromo c utilizando técnicas avanzadas de espectrometría de masas.
• Caracterizar los diferentes estados conformacionales adoptados por el citocromo c al calentarlo en solución.

Principales métodos:

• Se empleó la espectrometría de masa de movilidad de iones por electrospray a temperatura variable (VT-ESI-IM-MS).
• Se realizaron experimentos de despliegue inducidos por colisión para evaluar la estabilidad y la estructura de la fase gaseosa.
• Los experimentos de mezcla rápida descartaron el plegado de artefactos durante el análisis.

Principales resultados:

• El calentamiento del citocromo c dio como resultado diecinueve conformadores alargados y desplegados.
• Se observó que un nuevo conformador compacto, más compacto que el estado nativo, aumentaba en abundancia hasta 90 °C.
• El despliegue inducido por la colisión indicó estructuras distintas y estabilidades de fase gaseosa para los diferentes conformadores.

Conclusiones:

• El despliegue de proteínas a temperaturas más altas es más complejo de lo que sugiere el modelo de dos estados.
• VT-ESI-IM-MS es ventajoso para explorar diversos paisajes conformacionales de proteínas.
• Este estudio proporciona la primera evidencia de la formación simultánea de conformaciones desplegadas y compactas a partir de una sola solución de proteína al calentarla.