Fotoconversión mediada por luz roja de las rodaminas de silicio a las rodaminas de oxígeno para la microscopia de una...

Área de la Ciencia:

• Microscopía de fluorescencia
• Imágenes de súper resolución
• La fotoquímica

Sus antecedentes:

• Los tintes de rodamina son cruciales para la microscopía de fluorescencia, y las rodaminas de silicio permiten la emisión de rojo lejano para imágenes avanzadas.
• Las rodaminas de silicio de color rojo lejano son populares en la microscopía de localización de una sola molécula (SMLM) para imágenes de dos colores debido a la permeabilidad de la membrana.

Objetivo del estudio:

• Para investigar la fotoquímica de las rodaminas de silicio de color rojo lejano bajo iluminación.
• Identificar y caracterizar los fotoproductos que causan interferencias en el SMLM multicolor.
• Desarrollar estrategias para mitigar la interferencia y explorar nuevas aplicaciones de imágenes de súper resolución.

Principales métodos:

• Iluminación de rodaminas de silicio de color rojo lejano (por ejemplo, JFX650, JF669) a 640 nm.
• Análisis de los espectros de emisión para detectar fotoproductos.
• Aplicación de sistemas de eliminación de oxígeno para reducir la interferencia.
• Demostración de la microscopia de localización fotoactivada (PALM) sin rayos UV.

Principales resultados:

• Las rodaminas de silicio de color rojo lejano se convierten en rodaminas de oxígeno emisoras de color rojo mediante la sustitución de silicio por oxígeno después de una iluminación de 640 nm.
• Esta fotoconversión causa una emisión desplazada hacia el azul y una interferencia en el canal rojo.
• El ahorro de oxígeno redujo la interferencia hasta 16 veces.
• La PALM libre de rayos UV se logró con una eficiencia 5 veces mayor que la conversión de Cy5 a Cy3.

Conclusiones:

• La fotoconversión de la rodamina de silicio es un artefacto significativo en el SMLM multicolor, creando intermitencia.
• El ahorro de oxígeno minimiza efectivamente esta interferencia.
• El fenómeno de fotoconversión permite nuevas estrategias de PALM sin rayos UV y enfoques de imágenes multiplexadas.