Un enfoque de visualización de ARNm para la orientación covalente de un factor de virulencia de Staphylococcus aureus

Área de la Ciencia:

• La bioquímica
• Microbiología
• Química medicinal

Sus antecedentes:

• El Staphylococcus aureus (S. aureus) es un importante patógeno humano que causa más de un millón de muertes al año.
• Las hidrolasas de unión a fluorofosfonatos (Fphs) son clave para el metabolismo de los lípidos de S. aureus y la colonización del huésped.
• Las Fph son objetivos prometedores para nuevos diagnósticos y terapias debido a su expresión específica en Staphylococcus.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar y examinar bibliotecas de péptidos cíclicos para los inhibidores de Fphs utilizando la visualización de ARNm.
• Para crear inhibidores selectivos covalentes y sondas fluorescentes dirigidas a las enzimas Fph.
• Identificar posibles agentes diagnósticos y terapéuticos contra el S. aureus.

Principales métodos:

• Display de ARNm utilizado con un electrófilo de oxadiazolona (Ox) codificado genéticamente para examinar diversas bibliotecas de péptidos cíclicos.
• Se emplean contraselecciones con tipo salvaje (WT) y FphB catalítico muerto para mejorar la selectividad de la sonda.
• Se desarrollaron sondas fluorescentes basadas en péptidos cíclicos seleccionados para el etiquetado del sitio activo de FphB.

Principales resultados:

• Se han identificado péptidos cíclicos potentes y selectivos que inhiben covalentemente las enzimas Fph.
• Desarrolló sondas fluorescentes que marcan el sitio activo de FphB en concentraciones nanomolares de un solo dígito.
• Se ha demostrado el éxito del etiquetado de FphB en bacterias vivas de S. aureus.

Conclusiones:

• Los electrófilos codificados genéticamente en la visualización de ARNm son efectivos para generar ligandos de unión covalente.
• Las sondas fluorescentes desarrolladas son potentes y selectivas para FphB.
• Estas sondas son prometedoras para el desarrollo de nuevos diagnósticos y terapias para las infecciones por S. aureus.