Macrociclado de la cadena lateral de RiPPs por hongos catalizado por la enzima dependiente del cobre DUF3328

Área de la Ciencia:

• La bioquímica
• Biología molecular
• Enzimología

Sus antecedentes:

• Las enzimas fúngicas con dominio de función desconocida (DUF) 3328 están involucradas en la maduración oxidativa de péptidos sintetizados por ribosoma y modificados post-traducionalmente (RiPP).
• La comprensión de estas enzimas es crucial para elucidar nuevas vías biosintéticas.

Objetivo del estudio:

• Para caracterizar funcionalmente la enzima fúngica AprY, una proteína que contiene el dominio DUF 3328.
• Investigar el papel de AprY en la biosíntesis de la RiPP asperipina-2a.

Principales métodos:

• Reconstitución bioquímica de la enzima AprY.
• Ensayos in vitro para determinar la actividad enzimática y los requisitos.

Principales resultados:

• Se demostró que AprY catalizaba dos reacciones consecutivas de enlace cruzado C-O.
• Estas reacciones ocurren entre las tirosinas y los beta-carbonos dentro del hexapéptido central de la asperipina-2a.
• La actividad de macrociclado de la enzima depende del cobre y el oxígeno, pero es independiente de una secuencia de péptidos líder.

Conclusiones:

• AprY es una enzima clave en la biosíntesis de la asperipina-2a, mediando las reacciones esenciales de enlace cruzado C-O.
• Los hallazgos revelan nuevos conocimientos sobre los mecanismos de maduración oxidativa de los RiPP.
• AprY representa un objetivo potencial para aplicaciones de biología sintética que involucran la modificación de RiPP.