Bis ((trifluorometil) carborodaminas: colorantes de color rojo lejano a infrarrojo cercano para microscopia de...

Área de la Ciencia:

• Biología Química
• Microscopía
• Colorantes orgánicos

Sus antecedentes:

• Los fluoróforos sintéticos son cruciales para la microscopía, ya que ofrecen perfiles de excitación / emisión de larga longitud de onda (> 650 nm) difíciles para las proteínas fluorescentes.
• Los tintes clásicos de rodamina tienen limitaciones para lograr estos perfiles de longitud de onda larga y fluorogenicidad.

Objetivo del estudio:

• Introducir una nueva clase de tintes de bis (trifluorometil) carborodamina (BF).
• Para lograr perfiles de excitación y emisión >650 nm con mayor fluorogenicidad para la microscopía de células vivas.

Principales métodos:

• Análisis computacional y diseño de tintes BF.
• Síntesis de más de una docena de tintes BF utilizando la funcionalización en etapa tardía.
• Caracterización de espectros y pruebas de aplicación en microscopía de fluorescencia avanzada.

Principales resultados:

• Los tintes BF exhiben perfiles ópticos desplazados hacia el rojo (> 650 nm) con un alto brillo (coeficiente de extinción > 140,000 M-1 cm-1, rendimiento cuántico del 33%).
• Los grupos CF3 hacen que los tintes BF sean altamente fluorogénicos, mejorando la fluorogenicidad hasta 30 veces en comparación con las rodaminas con puente de silicio.
• Aplicaciones demostradas en el etiquetado intracelular sin lavado, imágenes funcionales y seguimiento de moléculas individuales.

Conclusiones:

• Los tintes de bis (trifluorometil) carborodamina proporcionan un enfoque novedoso y complementario para las imágenes de células vivas fluorogénicas de larga longitud de onda.
• Estos tintes superan las limitaciones de los andamios de rodamina existentes y las proteínas fluorescentes codificadas genéticamente.
• Los tintes BF permiten técnicas avanzadas de microscopía sin depender de las rodaminas de silicio dimetilo.