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Updated: Sep 14, 2025

Single-Molecule Imaging of Lateral Mobility and Ion Channel Activity in Lipid Bilayers using Total Internal Reflection Fluorescence TIRF Microscopy
Published on: February 17, 2023
Imágenes a largo plazo impulsadas por conteriones de membranas celulares y migrasomas utilizando AIEgenos NIR
Ziyue Ye1, Chengpeng Qiu2,3,4,5, Zonghang Liu1
1Guangdong Basic Research Center of Excellence for Aggregate Science, School of Science and Engineering, The Chinese University of Hong Kong, Shenzhen 518172, Guangdong, P. R. China.
Los investigadores desarrollaron nuevas sondas fluorescentes (CDPP-2X) para rastrear los migrasomas y las membranas celulares. CDPP-2PF6 muestra alta especificidad y estabilidad para imágenes a largo plazo, revelando información sobre la remodelación de lípidos durante la migración celular.
Área de la Ciencia:
- Biología celular
- La bioquímica
- Ciencias de los materiales
Sus antecedentes:
- El seguimiento de la formación y la dinámica del migrasoma es difícil debido a las limitaciones en la especificidad y la estabilidad del tinte de membrana actual para la obtención de imágenes extendidas.
- Los tintes existentes a menudo carecen de la selectividad y la longevidad necesarias para la observación detallada de los procesos celulares como la biogénesis del migrasoma.
Objetivo del estudio:
- Desarrollar nuevas sondas de emisión inducida por agregación (EIA) para el etiquetado selectivo y a largo plazo de membranas celulares y migrasomas.
- Investigar el mecanismo de la formación de los migrasomas y la remodelación de los lípidos utilizando técnicas avanzadas de imagen fluorescente.
Principales métodos:
- Síntesis y caracterización de las sondas AIE (CDPP-2X) de dador-π-aceptor diccionario con emisión en el infrarrojo cercano (NIR).
- Utilizando CDPP-2PF6 para el anclaje de membrana de doble modo (interacciones electrostáticas e hidrofóbicas) y imágenes a largo plazo (hasta 3 horas).
- Microscopía de imágenes con fluorescencia confocal (FLIM) para monitorear en tiempo real la dinámica de la membrana y los cambios en la composición lipídica.
Principales resultados:
- CDPP- 2PF6 demostró un rendimiento superior con una mayor lipofilia y un movimiento intramolecular restringido, lo que condujo a una fuerte fluorescencia y una retención prolongada en la membrana.
- La sonda se acumuló selectivamente en los migrasomas en 5 minutos, mostrando una fuerte afinidad por el fosfatidilinositol 4,5-bisfosfato (PIP2).
- Los tratamientos farmacológicos y los estudios de agotamiento del colesterol indicaron las funciones esenciales de la polimerización de actina y la integridad del microdominio lipídico en la formación de migrasomas y la localización de la sonda.
Conclusiones:
- CDPP-2PF6 es una plataforma robusta para imágenes de membrana y migrasoma a largo plazo, que ofrece una mayor especificidad y localización dependiente de fosfolípidos.
- La sonda proporciona información valiosa sobre la remodelación de lípidos durante la biogénesis del migrasoma y la migración celular.
- Esta tecnología abre nuevas vías para estudiar la señalización celular y los orgánulos ricos en fosfolípidos en la salud y la enfermedad.

