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Updated: Sep 10, 2025
A Loop-mediated Isothermal Amplification LAMP Assay for Rapid Identification of Bemisia tabaci
Published on: October 29, 2018
Ensayos de amplificación isotérmica por bucle múltiple para la identificación de Spodoptera eridania y Spodoptera
Seung Hyun Lee1, Jeong Sun Park1, Jee-Young Pyo1
1Department of Applied Biology, College of Agriculture and Life Sciences, Chonnam National University, Gwangju, Republic of Korea.
Los nuevos ensayos de amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP, por sus siglas en inglés) pueden detectar rápidamente las plagas del gusano del sur (SAW, por sus siglas en inglés) y del gusano de rayas amarillas (YSAW, por sus siglas en inglés). Estos ensayos ofrecen diagnósticos fiables en el campo para estas plagas de cuarentena reguladas.
Área de la Ciencia:
- Entomología agrícola
- Diagnóstico molecular
- Manejo de plagas
Sus antecedentes:
- El gusano del sur (SAW) y el gusano del amarillo (YSAW) son plagas de cuarentena reguladas en Corea del Sur y Europa, respectivamente.
- Su introducción fuera de sus áreas nativas plantea importantes amenazas económicas.
- Los métodos de detección exactos y rápidos son cruciales para prevenir la propagación de las plagas.
Objetivo del estudio:
- Desarrollar ensayos de amplificación isotérmica (LAMP) rápidos y aplicables en el campo por primera vez para detectar SAW y YSAW.
- Identificar regiones genómicas específicas de la especie para el diseño del ensayo.
- Validar la eficacia y la practicidad de los ensayos LAMP desarrollados.
Principales métodos:
- Se seleccionaron 5 y 6 regiones genómicas específicas de especies para SAW y YSAW a partir de secuencias de genoma completo, comparadas con 12 especies no objetivo.
- Se han desarrollado ensayos LAMP dirigidos a estas regiones genómicas específicas.
- El rendimiento del ensayo se probó utilizando ADN crudo extraído de los tejidos musculares de la antena, la pierna y el tórax.
- Tiempo estimado de detección y estabilidad de la mezcla de reacción LAMP.
Principales resultados:
- Se han desarrollado marcadores LAMP específicos para la detección de SAW y YSAW.
- Detección exitosa de ambas plagas utilizando muestras mínimas de tejido (1 antena, 1 pierna, 1/16 músculo torácico).
- Tiempos de detección rápidos: máximo 30 min para SAW y 35 min para YSAW, incluida la extracción de ADN.
- La mezcla de reacción LAMP se mantuvo estable hasta 20 días a -20°C.
- El método de incubación simplificado sin cortes de tejido dio resultados consistentes.
Conclusiones:
- Los ensayos LAMP desarrollados son herramientas confiables para el diagnóstico de SAW y YSAW en el campo.
- Estos ensayos pueden utilizarse individualmente o en combinación para mejorar la confianza en el diagnóstico.
- El carácter rápido y práctico de estos ensayos LAMP apoya una gestión eficaz de las plagas de cuarentena.
