Diferentes péptidos macrociclizados con tioéter a través de una maduración SAM radical

Área de la Ciencia:

• La bioquímica
• Biología Química
• Biotecnología

Sus antecedentes:

• Los enlaces disulfuro estabilizan los péptidos, pero son inestables en condiciones fisiológicas, lo que limita las aplicaciones biotecnológicas.
• PapB es una enzima S-adenosil-L-metionina que generalmente forma enlaces tioéteres en la maduración del péptido.
• Los péptidos producidos por ribosoma y los modificados por traslación requieren estrategias de estabilización.

Objetivo del estudio:

• Investigar el alcance del sustrato y la actividad enzimática de PapB más allá de su función conocida.
• Explorar el potencial de PapB en la formación de nuevos macrociclos de tioéter utilizando varios sustratos de aminoácidos.
• Para expandir la caja de herramientas enzimáticas para crear péptidos conformacionalmente restringidos.

Principales métodos:

• Ensayos enzimáticos utilizando PapB con varios sustratos péptidos, incluidos los con ácidos D y β-amino.
• Análisis de los productos peptídicos para confirmar la formación de macrociclos de α- y β-tioéter.
• Caracterización de la tolerancia de PapB a los aminoácidos no naturales dentro de los sustratos péptidos.

Principales resultados:

• PapB acopla eficientemente los tiolos Cys internos a los carboxilatos C-terminales de los péptidos que terminan en los ácidos D o β-amino, formando macrociclos de α o β-tioéter.
• PapB demuestra tolerancia a los aminoácidos β y N-metilo, lo que permite la síntesis de macrociclos compuestos enteramente de aminoácidos no naturales.
• PapB funciona como una ligasa tioéter agnóstica de la secuencia para la macrociclado C-terminal.

Conclusiones:

• PapB es una enzima versátil capaz de formar macrociclos de tioéter estables con diversos sustratos péptidos, incluidos los aminoácidos no naturales.
• Los hallazgos establecen PapB como una herramienta valiosa para construir péptidos conformacionalmente restringidos.
• Esta investigación amplía las posibilidades de las terapias basadas en péptidos y la biología química.