Un nuevo aptamer G-cuadruplex con alta afinidad para la detección específica del herpesvirus equino de tipo 1:...

Área de la Ciencia:

• Biología molecular
• Diagnóstico veterinario
• Biotecnología

Sus antecedentes:

• El herpesvirus equino tipo 1 (EHV-1) es un patógeno generalizado que causa problemas respiratorios, neurológicos y reproductivos significativos en los caballos.
• La detección precisa y sensible del EHV-1 es crucial para las estrategias efectivas de manejo y control de la enfermedad.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar y validar el primer aptamer formador de cuadruplexos G para la detección específica del herpesvirus equino de tipo 1 (EHV-1).
• Evaluar la afinidad de unión, la especificidad y el rendimiento diagnóstico del aptamer en comparación con los métodos convencionales.

Principales métodos:

• Diseño de aptamer in silico seguido de validación de la conformación G-cuadruplex in vitro mediante espectroscopia de CD y ensayos de violeta cristalina.
• Evaluación integral de la unión y la especificidad mediante ensayos colorimétricos, ELASA, SPR, espectroscopia de CD y análisis de fluorescencia.
• Comparación de los límites de detección basados en el aptamer con la PCR convencional.

Principales resultados:

• El aptamer G-cuadruplex demostró una alta afinidad de unión en el rango picomólico.
• Se logró la detección de tan solo 10 partículas virales de EHV-1 / ml, una mejora de 100 veces con respecto a la PCR convencional (1000 partículas virales / ml).
• ELASA exhibió un excelente rendimiento diagnóstico con un AUC de 0,96, y el método omite los pasos de extracción de ADN y PCR.

Conclusiones:

• El aptamer G-cuadruplex desarrollado es una herramienta altamente sensible y específica para la detección del EHV-1.
• Este ensayo basado en aptamer ofrece una solución de diagnóstico en el punto de atención rápida, rentable y fácil de usar para el EHV-1.
• La tecnología es muy prometedora para aplicaciones de campo y entornos de escasos recursos en medicina veterinaria equina.