Prueba NGS dirigida mejorada para el diagnóstico integral en pacientes con tuberculosis y tuberculosis resistente a...

Área de la Ciencia:

• Biología molecular
• Enfermedades infecciosas
• La genómica

Sus antecedentes:

• El diagnóstico preciso de la tuberculosis (TB) es crítico, pero los métodos actuales luchan con la sensibilidad, la detección de la resistencia a los medicamentos y la diferenciación de otros patógenos respiratorios.
• Las limitaciones en las herramientas de diagnóstico existentes requieren enfoques moleculares avanzados para el manejo integral de enfermedades respiratorias.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar y validar un ensayo de secuenciación dirigida de próxima generación (tNGS) basado en PCR múltiple para la detección simultánea de tuberculosis, mutaciones resistentes a medicamentos y otros patógenos respiratorios.
• Evaluar el rendimiento analítico y clínico del ensayo tNGS en pacientes con sospecha de tuberculosis.

Principales métodos:

• Desarrollo y validación analítica de un ensayo tNGS basado en PCR múltiple, que evalúe el límite de detección (LOD), la precisión y la resistencia a las interferencias.
• Evaluación clínica prospectiva del ensayo tNGS en 181 pacientes con sospecha de tuberculosis utilizando muestras de lavado broncoalveolar o de esputo, con comparación con el cultivo microbiológico y Xpert MTB/ RIF.

Principales resultados:

• El ensayo tNGS exhibió un bajo LoD (10 copias/mL) para la TB y otros patógenos, con alta precisión y resistencia a las interferencias.
• La validación clínica demostró una sensibilidad del 94,94% para la tuberculosis confirmada y un acuerdo del 92,86% con Xpert MTB/ RIF para la resistencia a la rifampicina, identificando mutaciones adicionales.
• El ensayo detectó con precisión micobacterias no tuberculosas (NTM) y otros patógenos respiratorios, lo que respalda el diagnóstico diferencial.

Conclusiones:

• El ensayo tNGS ofrece una detección confiable de la tuberculosis, mutaciones resistentes a los medicamentos y una amplia gama de patógenos respiratorios, incluido el NTM.
• Este ensayo mejora las capacidades de diagnóstico diferencial, ayudando en la selección de estrategias efectivas de tratamiento para pacientes con sospecha de tuberculosis.