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Updated: Sep 10, 2025
Circulating MicroRNA Quantification Using DNA-binding Dye Chemistry and Droplet Digital PCR
Published on: June 26, 2016
Detección comparativa de microARN en plasma sanguíneo mediante fluorescencia en luz visible e infrarrojo cercano con
Xuefei Gao1, Yingjie Hang2, Jennifer Boryczka2
1Department of Mechanical and Aerospace Engineering, West Virginia University, Morgantown, WV, 26506-6106, United States.
Una nueva tira de flujo lateral de papel de fluorescencia cercana al infrarrojo (NIRF-PLFS) ofrece una detección mejorada del microARN (miRNA) en el plasma sanguíneo. Este sensor avanzado supera las limitaciones de los métodos tradicionales, permitiendo la detección de biomarcadores sensibles para el diagnóstico en el punto de atención.
Área de la Ciencia:
- Ingeniería biomédica
- Química analítica
- Nanotecnología
Sus antecedentes:
- Las tiras de flujo lateral de papel colorimétrico (PLFS) se utilizan ampliamente para el diagnóstico, pero sufren de baja sensibilidad e interferencia de la matriz.
- La detección de microARN (miRNA) en muestras biológicas complejas como el plasma sanguíneo sigue siendo un desafío para las tecnologías PLFS existentes.
- Los tintes orgánicos de fluorescencia cercana al infrarrojo (NIRF) a menudo presentan una baja intensidad y fotoinstabilidad, lo que limita su aplicación.
Objetivo del estudio:
- Desarrollar un nuevo PLFS basado en NIRF para la detección directa y sensible de miRNA en plasma sanguíneo no diluido.
- Mejorar el rendimiento de los tintes NIRF encapsulándolos en nanopartículas de sílice para mejorar la estabilidad y la intensidad.
- Para comparar el rendimiento diagnóstico del NIRF-PLFS con un PLFS de fluorescencia de luz visible (VisF) para la detección de miARN en diversas matrices de muestras.
Principales métodos:
- Sincronización de las nanopartículas de sílice encapsuladas con colorantes para aplicaciones NIRF.
- Incorporación de nanopartículas NIRF en PLFS para la detección de miARN.
- Construcción de un VisF-PLFS de control para el análisis comparativo.
- Prueba de NIRF-PLFS y VisF-PLFS con miRNA en soluciones tampón y muestras diluidas de plasma sanguíneo.
Principales resultados:
- NIRF-PLFS y VisF-PLFS mostraron un rendimiento comparable para la detección de miRNA en soluciones tampón.
- En el plasma sanguíneo, el NIRF-PLFS demostró una mejora significativa del rango de detección lineal y del límite de detección en comparación con el VisF-PLFS.
- El NIRF-PLFS alcanzó un límite de detección de 50 pM para el miRNA en el plasma sanguíneo diluido, dos órdenes de magnitud más bajos que el VisF-PLFS.
- NIRF-PLFS exhibió una resistencia superior a las interferencias de las matrices de muestras complejas.
Conclusiones:
- NIRF-PLFS, que utiliza tintes NIRF encapsulados con nanopartículas de sílice, ofrece una mayor sensibilidad y una menor interferencia de la matriz para la detección de miRNA en el plasma sanguíneo.
- El NIRF-PLFS desarrollado supera las limitaciones de los PLFS convencionales basados en colorimetría y VisF, especialmente en muestras biológicas complejas.
- Esta tecnología es muy prometedora como herramienta de diagnóstico en el punto de atención para detectar biomarcadores de enfermedades en muestras de fluidos humanos.
