Método de espectrometría de masas dirigida para la determinación de múltiples metabolitos de la microbiota intestinal...

Área de la Ciencia:

• Química analítica
• La bioquímica
• Diagnóstico clínico

Sus antecedentes:

• Los metabolitos de la microbiota intestinal son biomarcadores vitales para el diagnóstico y la terapia de enfermedades.
• La cuantificación precisa de estos metabolitos en muestras biológicas es un reto analítico debido a las bajas concentraciones y la interferencia de la matriz.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar y validar un método analítico preciso para cuantificar siete metabolitos intestinales específicos en el plasma humano.
• Establecer una herramienta fiable para la investigación médica y los estudios clínicos relacionados con el análisis de metabolitos intestinales.

Principales métodos:

• Cromatografía líquida de muy alto rendimiento junto con espectrometría de masas triple cuadrupolo-tandem (UHPLC-MS/MS).
• Derivación química mediante el uso de 3-nitrofenilhidrazina seguido de la precipitación de proteínas.
• Validación mediante la columna BEH C18, el modo de ionización negativa y el monitoreo de reacción seleccionado (SRM).

Principales resultados:

• Se cuantificaron siete metabolitos intestinales: ácido acético, ácido propiónico, ácido butírico, sulfato de p-cresol, sulfato de 3-indoxilo, ácido indol-3-acético y L-triptófano.
• Se obtiene una excelente linealidad (r2 > 0,997), bajos límites de cuantificación (0,48 μM), alta precisión (87,0114%) y precisión (CV ≤ 13,5%).
• El método ha demostrado su viabilidad con un índice de grado de aplicabilidad azul (BAGI) de 65.

Conclusiones:

• El método UHPLC-MS/MS desarrollado es preciso, preciso y práctico para cuantificar los metabolitos intestinales clave en el plasma humano.
• Este método validado es adecuado para su aplicación en estudios clínicos con diversas poblaciones, incluidos niños y adultos.
• La cuantificación de estos metabolitos intestinales proporciona información valiosa para el diagnóstico de enfermedades y el monitoreo terapéutico en la investigación médica.