Desde la secuencia hasta la actividad: el sistema de modificación de restricción HgaI-homólogo RM.MhoVI de Mycoplasma hominis

Área de la Ciencia:

• Microbiología
• Biología molecular
• La genética

Sus antecedentes:

• Los sistemas de modificación de restricción (RM) son mecanismos de defensa procariotas contra el ADN extraño.
• Estos sistemas generalmente involucran metiltransferasas de ADN (MTases) y endonucleasas de restricción (REases).
• Se identificó un nuevo sistema de RM, RM.MhoVI, con dos metiltransferasas de 5-citosina (5mC-MTases), en Mycoplasma hominis.

Objetivo del estudio:

• Investigar la prevalencia y las características del sistema MhoVI-RM en Mycoplasma hominis.
• Confirmar la actividad de metilación y caracterizar la función del sistema MhoVI-RM.
• Analizar la organización genética y la conservación del sistema MhoVI-RM.

Principales métodos:

• Pruebas de detección por PCR cuantitativa (qPCR) de aislados de M. hominis.
• Análisis bioinformático de genomas secuenciados por nanoporos de Oxford.
• Expresión y análisis de la metiltransferasa recombinante (rM2.MhoVI) en E. coli.

Principales resultados:

• El sistema MhoVI-RM se encontró en el 12,97% de los 239 aislamientos de M. hominis, ubicados consistentemente entre MHO_3110 y MHO_3120.
• Se observó una alta conservación intraespecífica (> 99%) y una menor conservación interespecífica de las enzimas MhoVI.
• El análisis bioinformático reveló tasas de metilación > 95% para motivos específicos en aislados positivos para MhoVI, confirmadas por ensayos de protección de endonucleasa y actividad enzimática recombinante.

Conclusiones:

• RM.MhoVI es un sistema RM homólogo de HgaI prevalente en Mycoplasma hominis, caracterizado por dos 5mC-MTasas.
• El sistema exhibe una alta actividad de metilación, protegiendo el ADN del huésped a través de patrones específicos de metilación.
• La organización genética sugiere una estructura policistrónica, con roles potenciales para el regulador transcripcional co-localizado.