Las interacciones interdominianas modulan la cinética de repliegue y la agregación en un anticuerpo monoclonal

Área de la Ciencia:

• La bioquímica
• Ciencia de las proteínas
• Desarrollo de anticuerpos terapéuticos

Sus antecedentes:

• La estabilidad de los anticuerpos es crítica para la eficacia terapéutica y la vida útil.
• La comprensión de los mecanismos de despliegue y agregación de proteínas es esencial para el desarrollo biofarmacéutico.

Objetivo del estudio:

• Investigar el comportamiento de desdoblamiento y replegamiento del bevacizumab en condiciones de desnaturalización.
• Identificar las contribuciones específicas del dominio a la estabilidad y agregación de anticuerpos.
• Proporcionar ideas para diseñar anticuerpos terapéuticos más estables.

Principales métodos:

• Dispersión dinámica de la luz (DLS) para la detección de la agregación.
• Dicroísmo circular (DC) para el análisis estructural.
• Espectrometría de masas de intercambio de hidrógeno y deuterio (HDX-MS) para la cinética de despliegue.

Principales resultados:

• Se observó una cinética de despliegue distinta en todos los dominios de anticuerpos: C_H2 y V_H se desplegaron rápidamente, C_H3 se desplegó lentamente.
• La agregación se detectó después de la desestabilización de C_H3, lo que indica su papel crítico en la prevención de la agregación.
• Regiones propensas a la agregación identificadas en las porciones Fc y Fab, con V_H CDR H1 mostrando protección aberrante después del repliegue.

Conclusiones:

• La estabilidad del dominio C< sub> H 3 es primordial para prevenir la agregación de bevacizumab.
• El replegamiento cooperativo de los dominios C_H2-C_H3 y las interfaces C_H3-C_H3 es esencial.
• Tanto los dominios constantes como los variables contribuyen a la naturaleza compleja e interdependiente de la agregación de anticuerpos monoclonales.