Cuantificación absoluta de impurezas coelantes en medicamentos péptidos utilizando espectrometría de masas de alta...

Área de la Ciencia:

• Química analítica
• Ciencias Farmacéuticas
• Biotecnología

Sus antecedentes:

• Los medicamentos sintéticos de péptidos ofrecen terapias a medida, pero se enfrentan a desafíos en el manejo de las impurezas.
• Los métodos tradicionales como el RP-HPLC luchan por separar las impurezas de péptidos de baja abundancia y coelución.
• La espectrometría de masas de alta resolución de cromatografía líquida (LC-HRMS) es efectiva para la identificación, pero limitada en cuanto a la cuantificación.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar y validar dos estrategias de cuantificación de cromatografía líquida de ultra rendimiento y espectrometría de masas de alta resolución (UPLC-HRMS).
• Cuantificar con precisión dos impurezas peptídicas coelantes estructuralmente similares (des-Gly4 glucagón y des-Thr5 glucagón) en el glucagón sintético.
• Para comparar el rendimiento de los modos de exploración completa y de monitoreo de pseudo-reacciones múltiples (p-MRM) para la cuantificación de impurezas.

Principales métodos:

• Desarrollo y validación de métodos UPLC-HRMS utilizando los modos de exploración completa y p-MRM.
• Cuantificación de las impurezas de glucagón des-Gly4 y des-Thr5 en el glucagón sintético.
• Evaluación de la especificidad del método, la linealidad, el límite de detección, la precisión y la recuperación.

Principales resultados:

• Ambos métodos demostraron una alta especificidad y una buena linealidad (R2 > 0,99) en un rango de 0,25-25 μg/mL.
• Se han alcanzado límites bajos de detección (LOD) tan bajos como el 0,01% y límites de cuantificación (LOQ) en el 0,02%.
• Se observaron exactitud y precisión comparables (< 10% RSD) y recuperación (100-120%); la p-MRM mostró ligeramente mejor linealidad y sensibilidad.

Conclusiones:

• Los métodos UPLC-HRMS validados proporcionan una cuantificación precisa de las impurezas peptídicas críticas en el glucagón sintético.
• Tanto el escaneo completo como los modos p-MRM son adecuados para la cuantificación de impurezas, y el p-MRM ofrece ventajas potenciales.
• Estos métodos abordan el desafío del manejo de impurezas en el desarrollo de fármacos de péptidos sintéticos.