La espectrometría de masas de pulverización de papel con etiqueta de isótopos estables permite un perfil de alta...

Área de la Ciencia:

• La bioquímica
• Química analítica
• Diagnóstico biomédico

Sus antecedentes:

• Las proteasas son cruciales en enfermedades como el cáncer y la neurodegeneración.
• Los métodos convencionales de detección de proteasas luchan con muestras biológicas complejas.
• Los estándares internos de isótopos estables existentes son costosos y difíciles de sintetizar.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un método novedoso y rentable para la detección de la actividad proteasa sensible.
• Para crear nanosondas estables etiquetadas con isótopos (nanosondas SIL) para la cuantificación directa de la proteasa.
• Para permitir una medición precisa de la actividad de la calpina-2 (CAPN2) en suero.

Principales métodos:

• Conjugación de péptidos específicos de CAPN2 con nanopartículas de oro (AuNPs).
• Etiquetado de las nanosondas con nuevos reactivos de isótopos estables a través de la química de clic.
• Cuantificación de la actividad de CAPN2 en suero mediante espectrometría de masas por pulverización en papel (PS-MS).

Principales resultados:

• Se alcanzó un límite de detección bajo de 0.3807 ng/mL para la actividad de CAPN2.
• Efectos de matriz significativamente reducidos en muestras de suero.
• Se ha demostrado la cuantificación directa y precisa de la actividad de CAPN2 utilizando la estrategia SIL-nanosonda.

Conclusiones:

• Las nanosondas SIL desarrolladas ofrecen un método sensible y específico para la detección de la actividad de la proteasa.
• Este enfoque supera las limitaciones de los métodos convencionales y las costosas normas internas.
• La estrategia es adaptable para detectar otras actividades de proteasa, lo que mejora las capacidades de diagnóstico.