Video Experimental Relacionado
Updated: Jul 21, 2026
Multiplex Cytokine Profiling of Stimulated Mouse Splenocytes Using a Cytometric Bead-based Immunoassay Platform
Published on: November 9, 2017
Efectos comparativos de tres métodos de inactivación del SARS-CoV-2 en la detección de citoquinas mediante pruebas
Yifan Chen1, Ting Zhang2, Jie Zhang2
1Institute of Medical Innovation and Research, Peking University Third Hospital, Beijing, China; Cancer Center, Peking University Third Hospital, Beijing, China; Biobank, Peking University Third Hospital, Beijing, China; National Human Genetic Resources Center, National Research Institute for Family Planning, Beijing, China.
Los métodos de inactivación viral como el calor y la irradiación gamma tienen un impacto mínimo en la detección de proteínas en muestras de biofluidos. El tratamiento con paraformaldehído altera los niveles de citoquinas y quimioquinas, lo que afecta a ensayos como LEGENDplexTM para la investigación del SARS-CoV-2.
Área de la Ciencia:
- Biotecnología
- Virología
- Inmunología
Sus antecedentes:
- La inactivación viral es crucial para el manejo seguro de muestras biológicas, especialmente en la investigación del SARS-CoV-2.
- Los métodos de inactivación pueden alterar las estructuras de las proteínas, lo que afecta a las técnicas de detección molecular posteriores.
- Los ensayos de perlas citométricas (CBA), como LEGENDplexTM, son vitales para cuantificar las citocinas y las quimiocinas en los fluidos corporales.
Objetivo del estudio:
- Evaluar el impacto de los diferentes métodos de inactivación viral en los análisis inmunológicos basados en LEGENDplexTM.
- Determinar la estrategia de inactivación óptima para preservar la integridad de las proteínas en muestras de plasma y ascites para el perfil de citoquinas.
Principales métodos:
- Se han evaluado los métodos de desnaturalización térmica, de irradiación gamma y de inactivación del paraformaldehído (PFA).
- Se analizaron ocho muestras de plasma y ocho de ascites utilizando pruebas inmunológicas basadas en perlas LEGENDplexTM.
- Se cuantificaron veintiséis citocinas y quimiocinas para evaluar las alteraciones inducidas por el método.
Principales resultados:
- El tratamiento térmico y la irradiación gamma mostraron un impacto mínimo en los resultados del ensayo LEGENDplexTM tanto en el plasma como en la ascitis.
- El tratamiento con paraformaldehído (PFA) alteró significativamente los niveles de citoquinas y quimiocinas múltiples.
- Perforin, I-TAC (CXCL11), Eotaxin (CCL11) y MIP-3α (CCL20) fueron identificados como particularmente sensibles a todos los métodos de inactivación probados.
Conclusiones:
- El calor y la irradiación gamma son métodos de inactivación adecuados para la elaboración de perfiles de citoquinas utilizando ensayos LEGENDplexTM en muestras de biofluidos.
- El tratamiento con PFA debe utilizarse con precaución, ya que puede afectar a la detección de citoquinas y quimiocinas específicas.
- Los hallazgos ayudan a seleccionar métodos de inactivación adecuados para el análisis de proteínas confiables en estudios de virología, incluidos los que involucran al SARS-CoV-2.
