La combinación de reemplazo de suero knockout y plasma rico en factores de crecimiento no apoya la espermatogénesis...

Área de la Ciencia:

• Biología de la reproducción
• Biología celular
• Biología del desarrollo

Sus antecedentes:

• Las terapias contra el cáncer presentan riesgos de infertilidad, especialmente para los niños en la prepubertad.
• La preservación del esperma antes del tratamiento a menudo no es posible para este grupo demográfico.
• La espermatogénesis in vitro presenta un método potencial de preservación de la fertilidad utilizando tejido testicular inmaduro.

Objetivo del estudio:

• Evaluar la eficacia de un nuevo medio de cultivo que contiene plasma rico en factores de crecimiento (PRGF) y reemplazo de suero knockout (KSR) para apoyar la espermatogénesis in vitro.
• Evaluar el impacto de este medio en el desarrollo y la supervivencia de las células germinales en el tejido testicular de ratón inmaduro.

Principales métodos:

• Se cultivaron tejidos testiculares de ratones NMRI de cinco días de edad durante 42 días.
• Se compararon dos medios: el 5% de KSR + el 5% de PRGF (experimental) y el 10% de KSR (control).
• Se realizaron análisis histológicos, de expresión génica y de inmunofluorescencia para evaluar la espermatogénesis y la viabilidad celular.

Principales resultados:

• El medio 5% KSR + 5% PRGF condujo a una degeneración significativa de los túbulos seminiferos en comparación con el control.
• Se observó una reducción de la expresión de los marcadores de espermatogénesis (Plzf, Tekt1, Tnp1) y del marcador de proliferación Ki67.
• Se observó un aumento de la expresión del marcador pro-apoptótico Bax y una disminución de los niveles del marcador anti-apoptótico Bcl-2, lo que indica una mayor apoptosis.

Conclusiones:

• El medio de ensayo (5% KSR + 5% PRGF) es ineficaz para la espermatogénesis in vitro completa.
• Esta formulación puede inducir la apoptosis de las células germinales, lo que dificulta los esfuerzos de preservación de la fertilidad.
• Los hallazgos ofrecen ideas cruciales para optimizar futuros sistemas de cultivo para la preservación de la fertilidad en niños prepuberales sometidos a tratamiento contra el cáncer.