El mapeo de epítopos utilizando inmunopeptidómicos revela nuevos epítopos de células T CD8 inmunodominantes del...

Área de la Ciencia:

• Inmunología
• Terapia génica
• Proteomía

Sus antecedentes:

• La terapia génica mediada por el virus adeno-asociado (AAV) es prometedora para los trastornos genéticos.
• La inmunogenicidad del vector AAV, en particular la activación de las células T CD8, limita la eficacia terapéutica.
• Los métodos actuales que utilizan péptidos superpuestos no capturan completamente el inmunopéptido de cápsida AAV presentado naturalmente.

Objetivo del estudio:

• Para comparar la respuesta de las células T desencadenada por la superposición de péptidos frente a los péptidos proteómicos asociados al MHC (MAPPs) derivados de la cápside AAV9.
• Identificar epítopos de células T de la cápside AAV9 presentes de forma natural en donantes sanos.
• Proporcionar estrategias para mejorar la detección de las respuestas de las células T CD8 específicas de la cápside y reducir la inmunogenicidad del vector.

Principales métodos:

• Comparación de las respuestas de las células T a los péptidos cápsidos AAV9 derivados de MAPPs y superpuestos en PBMC de donantes sanos utilizando ensayos FluoroSpot.
• Identificación de epítopos de células T CD8 mediante el cribado de péptidos MAPP elutados de HLA Clase I.
• Análisis de la unión epitópica a los alelos HLA previstos y de la reactividad cruzada de las células T.

Principales resultados:

• Ambos tipos de péptidos requerían una fase de expansión para provocar respuestas de células T.
• Los péptidos derivados de MAPP y superpuestos expandieron poblaciones de células T en gran medida distintas.
• Se identificaron diez nuevos epítopos de células T CD8 a partir de 41 péptidos MAPP, con algunas respuestas observadas solo a epítopos más largos.

Conclusiones:

• Los péptidos derivados de MAPP proporcionan una representación más precisa del inmunopeptidoma de la cápside AAV9 que se presenta naturalmente.
• La identificación de nuevos epítopos de células T CD8 puede mejorar el monitoreo de las respuestas de células T específicas de AAV.
• Este enfoque ofrece estrategias para mitigar la inmunogenicidad del vector AAV en la terapia génica.