Detección de microorganismos que causan infecciones respiratorias humanas mediante la PCR múltiple de un solo tubo

Área de la Ciencia:

• Biología molecular
• Diagnóstico de las enfermedades infecciosas
• La bioinformática

Sus antecedentes:

• La superposición de síntomas de COVID-19 y otras infecciones respiratorias requiere una detección precisa y simultánea del patógeno.
• Se desarrolló una plataforma de PCR múltiple para abordar los desafíos de diagnóstico planteados por diversos patógenos respiratorios.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar y validar un ensayo de PCR múltiple para la detección simultánea de 22 patógenos respiratorios.
• Permitir la identificación rápida y precisa de los patógenos a partir de muestras clínicas.

Principales métodos:

• Diseño de Primer utilizando las secuencias de GenBank, Clustal Omega, Primer Express y Primer Explorer.
• Un ensayo de PCR múltiple de un solo tubo con fluoróforos distintos para la detección de patógenos.
• Análisis de 340 hisopos nasales y salivales clínicos mediante PCR y electroforesis capilar (EC).

Principales resultados:

• El ensayo detectó con éxito múltiples patógenos respiratorios en una sola reacción.
• El síndrome respiratorio agudo grave-coronavirus-2 (SARS-CoV-2) fue el patógeno más prevalente detectado (29%).
• El enterovirus fue el segundo patógeno más frecuentemente detectado (6,5%).

Conclusiones:

• El ensayo multiplex PCR-CE desarrollado es un método rentable y robusto para el cribado exhaustivo de patógenos respiratorios.
• Este ensayo facilita el diagnóstico rápido y simultáneo, lo que lleva a un tratamiento dirigido y a mejores resultados para los pacientes.