Filtración de flujo tangencial mejorada de proteínas precipitadas utilizando cassettes de membrana con pantalla

Área de la Ciencia:

• Biotecnología
• Ingeniería de Bioprocesamiento
• Purificación de las proteínas

Sus antecedentes:

• Los avances en el cultivo celular aumentan los títulos de anticuerpos monoclonales (mAb), lo que requiere un procesamiento posterior eficiente.
• La purificación continua ofrece una oportunidad para intensificar la biofabricación.
• La precipitación selectiva seguida de filtración es un proceso potencialmente continuo aguas abajo.

Objetivo del estudio:

• Evaluar la eficacia de la filtración por flujo tangencial de paso único (SPTFF) con membranas de microfiltración para la purificación continua de proteínas precipitadas.
• Para comparar el rendimiento de SPTFF en módulos de fibra hueca y en casete con pantalla.
• Desarrollar un sistema de purificación continua para los anticuerpos monoclonales.

Principales métodos:

• Precipitación de la inmunoglobulina G en suero humano utilizando ZnCl2 y polietilenglicol.
• Filtración de flujo tangencial de paso único (SPTFF) en módulos de cassette huecos y cribados.
• Determinación del flujo crítico mediante experimentos de paso de flujo.

Principales resultados:

• Los casetes con pantalla alcanzaron flujos críticos de hasta 250 L/m2/h, significativamente más altos que los módulos de fibra hueca.
• Un sistema SPTFF de dos etapas demostró hasta un 85% de conversión en un solo paso.
• El funcionamiento continuo durante 24 horas a 144 L/m2/h de flujo filtrado mostró una conversión del 80% sin contaminación significativa.

Conclusiones:

• Los casetes de membrana examinados muestran un potencial significativo para el procesamiento continuo intensificado de proteínas precipitadas como mAbs.
• El SPTFF en casetes filtrados ofrece un método viable para una purificación eficiente y continua en sentido descendente.
• Este enfoque promueve el desarrollo de flujos de trabajo de bioprocesamiento totalmente continuos.